报告基因检测,是真核基因表达调控研究的常用方法。由于检测光量子的方法非常敏感,采用生物发光(bioluminescent)法,是报告基因检测最常用的有效手段。荧光素酶(luciferase)催化底物荧光素的转化,发射出光子。萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase)和海肾荧光素酶(Ranilla luciferase)催化的发光反应,具有相似的光学特征和很好的浓度线性范围(7~8个数量级的线性范围),酶的检测灵敏度达10-18mol到10-20mol,但两者催化的化学反应底物和最适反应条件完全不同。这两种荧光素酶配合形成了十分有效的双荧光素酶报告基因系统,其中Ranilla luciferase通常作为内参照。
本试剂盒提供了一体化形式的双荧光素酶检测系统。采用通用裂解缓冲液,适合于两种荧光素酶活性的保持,且与其他类型的报告基因检测和蛋白含量检测兼容;优化的两种酶反应体系,使每种发光反应持续数十分钟,以便于手工操作多个样品;并保证Firefly luciferase发光及时淬灭,不影响后续Ranilla luciferase的测定;优化的反应体系还使两种荧光素酶活性比值趋于合理的敏感范围,更有利于后续数据的比较。
产品内容与储存方法: 名称 数量 保存条件
5x Universal Lysis Buffer (通用裂解液) 25 ml -20℃
Fassay Buffer I (虫酶缓冲液) 10 ml -20℃
Fassay Substrate I (虫酶底物) 0.5 ml -20℃
Rassay Buffer II (海酶缓冲液) 10 ml -20℃
Rassay Substrate II (海酶底物) 0.2 ml -20℃
可作100次双荧光素酶检测。低温运输,-20℃或-80℃避光保存。有效期6个月。