cDNA文库构建-分子生物学服务 -技术服务-生物在线
上海激活生物科技有限公司
cDNA文库构建

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产品名称: cDNA文库构建

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   cDNA文库不同于基因组文库,被克隆DNA是从mRNA反转录来源的DNACDNA组成特点是其中不含有内含子和其他调控序列。从而做cDNA克隆时应是先从获得mRNA开始,在此基础上,通过反转录酶作用产生一条与mRNA相互补的DNA链,然后除掉mRNA,以第一条DNA链为模板复制出第二条DNA链(双链);再进一步把此双链插入原核或真核载体。

cDNA文库构建一般分为六个阶段:

阶段1:反转录酶催化合成cDNA第一链

阶段2cDNA第二链的合成

阶段3cDNA的甲基化

阶段4:接头或衔接子的连接

阶段5Sepharose CL-4B凝胶过滤法分离cDNA

阶段6cDNA与λ噬菌体臂的连接

 

客户提供:

请您提供新鲜的且尽量多的材料

1如果实验材料为动物组织材料,样品质量需大于5 g

2如果实验材料为植物样品标本,样品质量需大于20 g

3) 如果实验材料为各种培养细胞,请您提供5×107以上培养好的细胞。

2. 您也可以直接提供给我们Total RNA,但要保证RNA没有降解,需要通过电泳等方法进行判断,其纯度

要求A260/A2801.8,样品总量需大于300 mg

我们将为您提供:

完整的实验报告,构建好的cDNA文库(提供给您的实验结果为连接产物形式)