产品介绍：

本产品是在超级生物素标记试剂盒（ARL0020SK）基础上的升级。本试剂盒操作不需要离心等步骤，操作更简便，标记效率更高，即使抗体含有BSA、叠氮钠、甘油等都不影响生物素标记效率，标记后实验背景更低，抗体损失更少。本试剂盒对样品更兼容。

本试剂盒亮点：

可以直接标记抗血清，腹水，细胞培养上清中的抗体，不需要事先纯化。

基本原理：

本试剂盒先将抗体固定在预处理超顺磁性聚合物微球表面，使抗体与其他蛋白分离，再将高活性的生物素标记在抗体上，通过洗脱、中和即可得到高纯度的生物素标记的抗体。可从血清、腹水等样品中分离出纯度大于90%的抗体并将其标记。

主要特点：

ü  试剂盒组分齐全，操作简单，只要按照操作步骤进行便可得到高品质Biotin-antibody偶联抗体；

ü  本试剂盒所配置的磁珠与抗体结合能力高，蛋白非特异吸附率低；

ü  本试剂采用的生物素为本公司自主设计优化合成的，增加了延长臂，标记效率更高，保证偶联物的特异性和均一性；解决了目前市面上所使用生物素标记后背景高，易脱落，抗体容易沉淀聚集或者抗体效价下降等情况。

ü  相较于传统生物素标记，本试剂盒操作时间短，不需要离心机等仪器。

试剂盒已经提供材料：

ü  抗体固定磁珠            100ul 

ü  活性生物素（干粉）     1支  使用前加助溶剂 220ul

ü  助溶剂                220ul

ü  标记缓冲液            30ml*1瓶

ü  抗体洗脱液            30ml*1瓶

ü  抗体稳定液            30ml*1瓶

ü  抗体保存液            2ml*1支

ü  磁力架                1支

ü  说明书                1份

其他需要自备试剂材料：

²  待标记的抗体

²  移液器及吸头

²  PBS(pH 7.2)

²  去离子水

²  旋转离心管摇床（非必须）

试剂盒储存

试剂盒活性生物素（干粉）放在-20˚C，磁力架室温存放，其余组分放在2-8 ˚C可保存12个月以上。

试剂盒操作流程（按1mg抗体标记量）：

实验前，将试剂盒各组分平衡到室温；

1.抗体的固定分离

1）取出抗体固定磁珠，吸头（用剪刀剪去吸头尖部，使吸口变大）吹打成悬浊液，立即取出适量磁珠悬浊液（此时磁珠为50%悬浊液，按照100ul悬浊液对应1mg抗体），加到1.5ml离心管中，将离心管放入磁力架上，待磁珠被全部吸附到离心管侧壁，将移液器吸头插入到离心管底部吸干磁珠保护液；

2）将离心管移出磁力架，加入1ml PBS缓冲液，吹打成悬浊液，重新放入磁力架静置，待磁珠被全部吸附到离心管侧壁，将移液器吸头插入到离心管底部吸干PBS；

3）重复上步骤2-3次；

4）将磁珠离心管移出磁力架，待标记抗体（抗血清，腹水或者细胞上清）用PBS调整为约2mg/ml浓度，加入磁珠离心管中，盖紧管盖，放在离心管旋转摇床上摇晃30分钟；

5）将离心管重新放回磁力架，待磁珠被全部吸附到离心管侧壁，将移液器吸头插入到离心管底部吸干液体；

6）重复步骤2 三次；

2. 生物素标记抗体

1）将离心管移出磁力架，加入适量抗体标记缓冲液（1mg抗体加入200ul标记缓冲液），同时取出活性生物素（干粉），用助溶剂调整成10mM浓度，按照1mg抗体取13.5ul生物素加入上述离心管。

2）将离心管固定在离心管旋转摇床上室温反应1个小时或者4℃反应过夜；

3）将离心管重新放回磁力架，待磁珠被全部吸附到离心管侧壁，将移液器吸头插入到离心管底部吸干液体；

4）将离心管移出磁力架，加入1ml PBS缓冲液，吹打成悬浊液，重新放入磁力架静置，待磁珠被全部吸附到离心管侧壁，将移液器吸头插入到离心管底部吸干PBS；

5）重新以上步骤2-3次；

6）将离心管移出磁力架，按照1mg抗体对应400ul抗体洗脱液，吹打磁珠10次，将离心管重新放回磁力架，待磁珠全部被吸附到离心管侧壁，将移液器吸头插入到离心管底部吸取全部的洗脱标记抗体，转移到新的离心管，立即加入100ul抗体稳定液，即得到生物素标记的抗体。

3. 生物素标记抗体的保存

加入等体积抗体保存液，-20℃保存。

4. 生物素标记抗体的标记效率计算

请参考Frdbio® HABA法生物素标记效率检测试剂盒(货号：ARL0021T1)

5. 生物素标记抗体的使用

一般来说生物素标记的抗体不能直接使用，需要配合链霉亲和素标记复合物使用，比如：FITC链霉亲和素(FITC- conjugated Streptavidin)，HRP链霉亲和素(HRP- conjugated Streptavidin)

注意事项：

1） 本试剂盒只针对抗体（非IgM亚型）的生物素标记。若标记其他非抗体蛋白试剂，可选择货号ARL0020K的生物素标记试剂盒。

2） 本试剂盒中活性生物素为高活性试剂，请-20℃保存；其余成份2-8℃保存、勿冻存。

3）本试剂盒中组分抗体洗脱液若有沉淀析出，为正常现象，离心取上清即可。

4）试剂盒组份在运输过程中可能造成颠倒，会使液体或干粉试剂粘到管壁或瓶盖上。使用前请离心处理，以使附着管壁或瓶盖的液体或干粉试剂沉积到管底。

5）活性生物素需现用现配，干粉溶解后不能长期保存；

6）抗体洗脱后，需尽快加入抗体稳定液；

7）本试剂盒中的磁力架中磁铁为特殊材质，避免长时间放在磁铁和铁磁性材质附近，避免磁力消失。

8）  本试剂盒中部分试剂为高活性试剂，对皮肤和身体有一定的危害，请全程戴手套操作；