一、客户提供信息:

◆ 客户具体需要的服务项目

◆ 所要表达的外源基因的名称，序列，客户如有现成的DNA模板可提供并提供电泳图片，图谱等相关信息

◆ 所要选择的慢病毒载体（我们现在可供选择具有GFP，lacZ报告基因及不带报告基因的慢病毒载体）

◆ 所需要表达的外源基因是否要带有融合标签，如果需要请选择需要的标签，并选择加入标签的位置

◆ 是否需要检测外源基因的表达，如需要请提供相应的抗体

◆ 所需要的病毒滴度

◆ 如需要筛选稳定细胞株的客户需选择符合自己需要的细胞株（可以自行提供）

1.1慢病毒包装服务特点：

1.1.1直接包装成为假病毒颗粒，对分裂和非分裂细胞均有感染作用，适合RNAi研究和体内实验中难于转染的细胞 (比如神经元细胞、干细胞或其它原代细胞)。

1.1.2可以通过简单方式，在短时间内获得稳定表达特定基因的多种细胞株。

1.1.3可用于基因敲除、基因治疗和转基因动物研究。

1.1.4无需任何转染试剂，操作简便。

1.1.5可以根据客户需要制备多种标记。

1.2原理：

慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体，与化学合成的siRNA和基于瞬时表达载体构建的普通siRNA载体相比，一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用，另一方面，Lentivirus-siRNA克隆经过慢病毒包装系统包装后，可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞，并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组，进行长时间的稳定表达。

1.3慢病毒包装简要流程：

1.3.1含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化提取。

1.3.2慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞。

1.3.3培养48hrs - 72hrs左右，收集含有病毒的上清培养液。

1.3.4病毒的纯化和浓缩。

1.3.5分装、- 80 ^oC保存。

1.3.6滴度测定。

1.4本公司提供的最终产品包括：

1.4.1重组后的慢病毒载体质粒以及测序图谱。

1.4.2产品无菌检测结果。

1.4.3慢病毒储液及相应的病毒滴度。

1.5我们保证：

1.5.1 制备的病毒颗粒携带片段的正确性

1.5.2 病毒颗粒的总数和病毒滴度：如无特殊要求我们提供1mL滴度为1×10⁷ - 1×10⁸ vp/ mL的病毒储液。