实时荧光定量PCR服务
产品名称： 实时荧光定量PCR服务
英文名称： real-time PCR
产品编号：
产品价格： 120
产品产地： null
品牌商标： null
更新时间： null
使用范围： null
北京百民敬生物科技有限公司
- 联系人 :
- 地址 : 海淀区交大东路46号大和恒商务楼309
- 邮编 : 100044
- 所在区域 : 北京
- 电话 : 186****9741 点击查看
- 传真 : 点击查看
- 邮箱 : hkgene_why@163.com
服务名称： 实时荧光定量PCR服务
技术原理
Real-time PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，通过Ct值和标准曲线的分析对起始模板进行定量分析。
实时荧光定量PCR技术具有特异性强，有效解决了PCR污染问题、自动化程度高等特点，做到PCR每循环一次就收集一个数据，建立实时扩增曲线，准确地确定Ct值，从而根据Ct值确定起始DNA拷贝数，做到了真正意义上的DNA定量。
服务流程（含逆转录）
1、RNA的提取
2、DNase I 消化样品RNA 中的DNA
3、RNA琼脂糖凝胶电泳
4、RNA反转录为cDNA
5、引物设计合成、探针设计合成（探针法）
Real-Time PCR引物设计的要求
① Tm=55~65 oC
② GC=30~80%
③ PCR扩增产物长度：引物的产物大小不要太大，一般在80~300 bp之间都可。
④ 引物的退火温度要高，一般要在60oC以上。选择特异性好，扩增效率高的引物。