蛋白质测序-蛋白相关服务 -技术服务-生物在线
西农生(北京)生物技术有限公司
蛋白质测序

蛋白质测序

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产品名称: 蛋白质测序

英文名称: protein sequence

产品编号:

产品价格: 240

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品牌商标: null

更新时间: 2023-09-21T16:17:31

使用范围: null

西农生(北京)生物技术有限公司
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地区: 北京
简介: 蛋白质测序
提供商: 西农生(北京)生物技术有限公司
服务名称: 蛋白质测序技术服务

  

 服务内容
 质谱方法在蛋白质测序中成为核心部分,带来的结果是蛋白质分析鉴定上的是高通量、自动化与精确性。同时Edman降解方法仍然是难度比较高的蛋白测序的重要补充。
本公司可开展蛋白质的N-端氨基酸序列测定工作:一次可以连续测定30个以上氨基酸
 
仪器(岛津PPSQ-21测序仪)
 
Edman化学降解测序介绍
  蛋白质和多肽N-端测序技术是以Edman化学降解法为基础的,Edman化学降解,其基本原理是包括通过异硫氰酸苯脂与蛋白质和多肽的N-端残基的偶联,苯氨基硫甲酰酞(PTC-肽)环化裂解,和噻唑呤酮苯氨(ATZ)转化为苯异硫尿氨基酸(PTH- 氨基酸)三个主要的化学步骤,每个循环从蛋白质与多肽裂解一个氨基酸残基,同时暴露出新的游离的氨基酸进行下一个Edman降解,最后通过转移的PTH-氨基酸鉴定实现蛋白质序列的测定。因为技术原因,Edman降解无法处理N端被封闭的蛋白或多肽,例如N端被甲基化、乙酰化等的,这些蛋白多肽无法正常测序,如果确有必要的话可以考虑用蛋白酶将蛋白切割为多肽,对所得的多肽纯化后测序。因为蛋白测序判读的依据为每次化学降解所得到的氨基酸的色谱图,因此Edman降解法对于蛋白多肽的纯度要求比较高,一般要求在90%以上,而且不能含有诸如SDS等变性剂以及盐,并且对样品本身的绝对量要求也比较高。
 
应用领域

  1. 样品来源:动物,植物,微生物等
  2. 样品种类:天然蛋白,表达蛋白,融合蛋白,合成多肽等
  3. 纯化方式:液相纯化,二维电泳分离,PVDF转膜等


样品要求
1.含量:建议送样量不低于 50pmol
2.状态:液体、冻干粉或PVDF转膜样品均可
3.纯度:建议95%以上纯度
4.性质:注明其溶解性,挥发性,毒性/腐蚀性等
5.信息:表观分子量;修饰信息;样品组织来源及制备方法信息
6.其它:A. N端未封闭
B.缓冲液中不要包含氨基酸成分,如甘氨酸
C.不含干扰物质:去污剂、胺、盐、氨基酸、非挥发性缓冲液、蛋白酶等
D.样品需要转膜制备时,建议将样品交由我们代为处理,并同时提供相应的电泳方法与带有mark的电泳照片
E. 样品如有特殊理化性质(如膜蛋白,特殊酶活性,特殊结构等),请详细说明
F. 若为已知序列样品,请告知预期序列信息
 

详见公司网站 http://www.scilongs.com/News/ShowArticle.asp?ArticleID=26