乳铁蛋白（Lactoferrin, Lf）是一种主要存在于哺乳动物乳 汁中的糖蛋白，相对分子量约为80KD，乳铁蛋白在体内不仅参与铁的转运，还具有抗菌、抗病毒、抗氧化和免疫调节的功能。被认为是一种新型的抗菌、抗癌药物和具有开发潜力的食品和饲料添加剂。目前已被广泛添加于婴幼儿食品中。

肝素亲和柱可特异吸附乳铁蛋白，试样中的乳铁蛋白经缓冲液提取，用肝素亲和柱净化后的样品液可直接用于HPLC分析。肝素亲和柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的，以改善信噪比，可提高检测方法的准确度。

乳铁蛋白高效液相法参考条件 ：

（1）色谱柱信息：C4 C4 250mm×4.6mm×5μm，300Å 

（2）系统前期准备工作 以最开始洗脱时 AB 流动相配比为准，最后基线平稳后开 始进样； 

（3）乳铁蛋白样本洗脱程序，梯度洗脱方法为： 0- 5min A 70%, B 30%; 5.0-10min A 45%, B 55%; 10.00-12min A 40%, B 60% 12.00-16min A 70%, B 30% A 液：0.1% TFA； B 液：乙腈。 

（4）乳铁蛋白检测条件 检测波长：紫外 280nm 柱温：30℃ 进样体积：30μL 流速：1mL/min （5）维护方法 使用后进空针，运行梯度洗脱程序，确认色谱柱无乳铁 蛋白洗出，再用甲醇水清洗色谱柱