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百奥迈科生物技术有限公司
全位点siRNA表达文库构建服务

全位点siRNA表达文库构建服务

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产品名称: 全位点siRNA表达文库构建服务

英文名称: full-site siRNA Library

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百奥迈科生物技术有限公司
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 (目标:抑制效率>90%的基因沉默位点)

随着RNA干扰(RNAi)技术的不断深入,挑选最佳的基因沉默位点(乃至RNA药物的靶点)所碰到的难题是用电脑软件设计出的siRNA往往不是最佳的靶点。为了有效快捷的筛选出具有药物开发价值的siRNA,本公司开发了自主知识产权的全位点siRNA文库构建技术,能够从全长cDNA构建包含所有有效结合位点,长度分布于19 - 23bp的靶基因的siRNA分子库,亦可以模仿体内Dicer酶切割长度为21 - 23bp的分子库,适用于高通量功能基因及相关药物靶点筛选。

1.   构建流程示意图:

2. 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

构建流程:

2.1客户可选:

2.1.1提供靶基因的cDNA克隆。

2.1.2提供靶基因的相关信息 (基因的mRNA序列或Genbank Accession Number),本公司进行全长基因合成。

也可在本公司的cDNA产品目录中,挑选靶基因cDNA克隆。

2.2进行siRNA文库构建,抽样测序验证。

2.3根据客户要求提供相应的siRNA文库克隆。

2.4将其连同抽样报告、产品说明书一起寄送到客户手中。

3.特色服务:

本公司还可以为客户提供如下特色服务:

3.1目的基因序列进行同源性分析,选择和其他基因无同源性区域的cDNA片段(高度保守区)进行全位点siRNA表达文库构建。

3.2根据客户的需求,对特定区域的cDNA片段进行全位点siRNA表达文库构建。

3.3分析相关文献,选择与特定基因功能研究密切相关的cDNA特定区域,进行高效的特异性的全位点siRNA表达文库构建。

3.4本公司还可以提供全位点siRNA表达文库筛选服务。

4. 构建的文库标准以及价格:

4.1全位点siRNA表达文库标准如下:

4.1.1构建文库的复性:>3×基因长度。

(如1000bp的基因,siRNA位点单克隆数>3000,以此类推。)

4.1.2构建文库重组率>75%

4.2全位点siRNA表达文库价格。

基因片段长度

价格

≤300bp

20,000/文库

300bp

请询价

4.3全位点siRNA表达文库靶点筛选价格:

RNAi沉默效果鉴定是运用实时荧光定量PCR

靶点数目(个)

价格

≤60

20,000/30个位点

60

请询价

5.本公司实验性全位点siRNA文库资料共享

5.1HBV Polymerase Domain siRNA表达文库位点分布(随机抽样测序)

Polymerase Domain (984bp):

由此可见,本公司的全位点siRNA文库位点分布随机,代表性强,适用于siRNA药物靶点筛选的发现

5.2构建的Survivin基因全位点siRNA表达文库,文库, , 抽样基因沉默(qPCR)筛选结果:

文本框: siRNA-1到siRNA-8:随机从Biomics构建的Survivin 基因siRNA文库中挑选的siRNA序列
siRNA-9/siRNA-10/siRNA-11:文献报道的siRNA序列


该数据显示,本公司siRNA文库位点分布的随机性,筛选到沉默率达96%的最佳靶点。