TALEN(transcription activator-like effector nucleases,TALENs)靶向基因修饰/敲除技术是最近发展起来的一项极具革命性的新技术。用TALEN方法制作knock out小鼠，不需要经过传统敲除所需要的ES细胞打靶阶段，周期大大缩短。相比于ZFN技术，TALEN的优势也非常明显突出，它的识别切割的效率更高，几乎可以靶向任何序列，不受上下游序列的影响。
TAL (transcription activator-like)effectors是细菌Xanthomonas感染植物时分泌的蛋白分子。这些蛋白分子通过其中心区的34个氨基酸的重复序列识别并结合到宿主基因的启动子上，激活植物基因的表达，从而帮助细菌进行感染。TAL effectors的此特征很快被大家认识并利用来作为靶向基因编辑的工具。
TALEN(transcription activator-like effector nucleases,TALENs)靶向基因修饰/敲除技术是最近发展起来的一项极具革命性的新技术。TALEN蛋白分子包含DNA结合域和Fok1核酸酶，两个TALEN分子分别结合到靶点两侧，Fok1形成二聚体并发挥切割作用，生成双链断端，细胞内的非同源性末端接合(Non-homologousend joining, NHEJ)修复机制启动，断口被修复同时随机的删除和插入一定数量的碱基，造成移码导致基因失活。
用TALEN方法制作 knock out小鼠，不需要经过传统敲除所需要的ES细胞打靶阶段，周期大大缩短。相比于ZFN技术，TALEN的优势也非常明显突出，它的识别切割的效率更高，几乎可以靶向任何序列，不受上下游序列的影响。此项技术现已经成功应用于细胞、斑马鱼、果蝇、大鼠、小鼠及植物上，并且被研究者不断地尝试应用到其他更多的物种。此技术为研究者提供了一种新的思路，开辟了一条崭新的道路。

敲除小鼠制作流程

•    分析gene序列，选择靶位点，设计TALEN载体

•    测试TALEN载体的打靶效率

•    受精卵的显微注射，移植

•    F0代小鼠的鉴定

•    F0代小鼠的遗传检测

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