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RNA-seq 数据分析

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产品名称: RNA-seq 数据分析

英文名称: RNA-seq 数据分析

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                           数据分析项目:

 

一.测序质量分析

对测序的原始数据进行初步分析,包括可以mapping的序列的百分比、各个不同样本以及重复样本之间的相关性、各个测序平台之间的实验重复性好坏等等,并制作散点图、直方图、文氏图等。

 

二.Mapping序列定位基因组

基于不同的参考文库(reference sequences),我们可以将测序结果定位到不同的注释中,比如基因组、refseq数据库、EST数据库、Ensemble数据库、Exon junction文库等等。然后给出测序结果在注释中的分配情况。

 

三.基因表达量定量

对于mapping之后的结果,我们采取多数文章经常采用的RPKMReads Per Kilobase of exon per Million mapped sequence reads)进行基因表达定量。

 

四.表达水平整体分析

对于多样本转录组,我们对实验进行总体分析,包括主成分分析和聚类分析等,并制作PCA图、聚类分析图、热图等。

 

五.基因差异表达筛选

由于测序技术有更大的通量,并且可以获得新的转录本的信息,所以在做样本间不同表达基因的筛选的时候优势很大。对于不同的样本信息,我们采取不同的统计手段,比如student-t test, F-test等得到不同样本间特异表达的基因或基因集团。

 

六.基因本体分析(Gene Ontology Analysis

对于得到的特定基因分类,我们采取DAVIDEasyGO等基因本体分析工具对所得结果进行功能分析,并得到可能的富集功能,绘制相关图和表格。

 

七.Pathway analysis

基于KEGG等数据库,我们采取超几何分布检验等统计手段,得到显著富集的生物信号通路或者代谢通路。

 

八.新转录本发掘

对于那些没有定位到已知基因位置的序列,有以下的几种可能:

1。这些序列属于背景转录。

2。这些序列来自一些非编码RNA的片断。

3。这些序列来自一些已知基因的延伸片断或邻近区域。

4。这些序列来自一些未知的比较微量表达的基因。

通过对比这些序列和已知基因的碱基组成和表达量情况,我们可以进行新基因的预测。


九.新选择性剪切发掘

基于那些可能mappingexon-exon junction上的序列,我们可以得到新的选择性剪切的信息。TopHat,WASP等软件可以进行类似的分析。