RNeasy Plus微型和微型套件
产品名称: RNeasy Plus微型和微型套件
英文名称: RNeasy Plus Micro and Mini Kits Print
产品编号: 74034
产品价格: 0
产品产地: 德国
品牌商标: Qiagen
更新时间: 2023-11-30T17:06:53
使用范围: null
深圳艾维迪泰生物科技有限公司
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从细胞/组织样本中纯化不含苯酚的总RNA,配有基因组DNA去除柱
RNeasy Plus Kits将快速方便的RNA纯化步骤和有效去除基因组DNA污染整合在一起。使用该试剂盒能够从多种培养细胞和易裂解组织中纯化获得高纯度、高产量RNA。RNeasy Plus Mini Kit 一次能够纯化获得100 µg总RNA(〉200 nt),并且高效去除基因组DNA。RNeasy Plus Micro Kit则适用于样本量较少的情况,可分离获得45 µg总RNA。该试剂盒可在QIAcube全自动核酸纯化仪上实现自动操作,可用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent方便的稳定组织样本。
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货号/ ID:74034 RNeasy Plus微型套件(50) 50次微量制备:RNeasy MinElute离心柱,gDNA消除柱离心柱,收集管,载体RNA,无RNase的水和缓冲液 |
货号/ ID:74134 RNeasy Plus迷你套件(50) 适用于50次微量制备:RNeasy微型旋转柱,gDNA消除器旋转柱,收集管,无RNase的水和缓冲液 |
货号/ ID:74136 RNeasy Plus迷你套件(250) 250次微量制备:RNeasy微型旋转柱,gDNA消除器旋转柱,收集管,无RNase的水和缓冲液 |
RNeasy Plus Micro and Mini Kits适用于分子生物学应用。该系列产品不可用于疾病的诊断、预防或治疗。
性能
使用RNeasy Plus技术从细胞和组织中提取RNA,产物不含基因组DNA,产量高、可重复性好,适用于敏感的下游应用(参见Effective cell genomic DNA removal, Effective tissue genomic DNA removal, High, reproducible RNA yields和Array-ready RNA)。从组织和培养细胞中提取的RNA完整性Agilent RIN数值接近10。
该试剂盒纯化产物不含短于200个核苷酸的RNA(如rRNA和tRNA),因此有富集mRNA的效果。如需从培养细胞中分离获得含有小RNA(如miRNA)的总RNA,我们提供专门的分离方案作为补充,请参见产品使用手册。
该试剂盒纯化产物不含短于200个核苷酸的RNA(如rRNA和tRNA),因此有富集mRNA的效果。如需从培养细胞中分离获得含有小RNA(如miRNA)的总RNA,我们提供专门的分离方案作为补充,请参见产品使用手册。
原理
细胞和易裂解组织首先在含有异硫酸胍的高变性Buffer RLT Plus中裂解和匀质化,能使RNases立即失活,以保证分离到完整的RNA。裂解液再流过gDNA Eliminator柱。该离心柱与高盐缓冲液共同作用,可选择性高效的去除基因组DNA。加入乙醇以提供RNA结合的合适条件,样本再加入到RNeasy离心柱。含有硅胶膜的特制离心柱能特异性的结合裂解细胞中的RNA。
对于多脂和难裂解组织,推荐使用RNeasy Plus Universal Kits。对于高通量的总RNA纯化,推荐使用RNeasy Plus 96 Kit。如需从其他类型样本中分离含有miRNA的总RNA,推荐使用miRNeasy Kits。
对于多脂和难裂解组织,推荐使用RNeasy Plus Universal Kits。对于高通量的总RNA纯化,推荐使用RNeasy Plus 96 Kit。如需从其他类型样本中分离含有miRNA的总RNA,推荐使用miRNeasy Kits。
程序
RNeasy Plus Micro Kit能从多达5 x 105个细胞或5 mg组织中分离总RNA,RNeasy Plus Mini Kit能够从107个细胞或30 mg组织中分离总RNA。简洁的工作流程可在25分钟内纯化得到已去除基因组DNA的RNA。样本首先被裂解和匀质化。裂解液流过gDNA Eliminator柱,在流过gDNA Eliminator柱的溶液中加入乙醇,样本再上样到RNeasy离心柱。RNA结合到膜上,污染物被洗去。获得高品质RNA,RNeasy Plus Micro Kit的洗脱体积为14 µl,RNeasy Plus Mini Kit的洗脱体积为30 µl。
处理不同的起始样本可用不同的实验方案。实验方案的不同之处主要在于样本的裂解和匀质化。样本上样到gDNA Eliminator柱之后的步骤就类似。
使用Buffer RLT Plus(RNeasy Plus Micro Kit提供)进行组织破碎和匀质化时,可能会产生过多泡沫。在破碎和匀浆前向Buffer RLT Plus中加入Reagent DX(单独提供)可充分减少泡沫产生。Reagent DX经仔细检测,表明配合此试剂盒使用不会影响RNA的纯度或下游应用。
处理不同的起始样本可用不同的实验方案。实验方案的不同之处主要在于样本的裂解和匀质化。样本上样到gDNA Eliminator柱之后的步骤就类似。
使用Buffer RLT Plus(RNeasy Plus Micro Kit提供)进行组织破碎和匀质化时,可能会产生过多泡沫。在破碎和匀浆前向Buffer RLT Plus中加入Reagent DX(单独提供)可充分减少泡沫产生。Reagent DX经仔细检测,表明配合此试剂盒使用不会影响RNA的纯度或下游应用。
应用领域
RNeasy Plus Kit纯化得到的RNA适合对少量DNA污染敏感的下游应用,如定量real-time RT-PCR和RNA-Seq。纯化得到的RNA还可用于其他应用。
RNeasy Plus Micro Kit适用于小样本,包括:
RNeasy Plus Micro Kit适用于小样本,包括:
- 激光显微切割冰冻切片
- 细针穿刺
技术指标
特征 | 技术指标 |
应用 | RT-PCR,实时RT-PCR,微阵列 |
洗脱体积 | 14微升 |
规格 | 旋转柱 |
整合基因组DNA去除步骤 | 是 |
主要样本类型 | 组织,细胞 |
处理 | 手动(离心) |
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 | 总RNA |
样本量 | 5x10e5cells或5mg组织 |
技术 | 二氧化硅技术 |
每次运行或制备时间 | 25分钟 |
产量 | 变化 |