蛋白质phosphorylation是一种重要的翻译后修饰（PTM），它动态可逆的调控细胞中几乎任意一个生物学过程。phosphorylation信号通路的失调是癌症等诸多疾病的标志性事件，同时蛋白激酶也是许多药物的主要作用靶点，因此具有极大的研究价值。伴随着基于质谱的蛋白质组学技术和phosphorylation多肽富集方法以及高通量定量技术的不断发展，phosphorylation蛋白组学已经成为目前最为成熟的PTM研究方向。TiO2 对phosphorylation多肽具有很高的特异性，广泛运用于丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸（pSTY）的phosphorylation富集研究；酪氨酸phosphorylation（pY）丰度往往较低，TiO2富集后也较难检测，通常需要采用特异性抗体进行富集，或与TiO2 串联富集。结合phosphorylation富集技术的高效性与质谱技术的高通量，深入研究在各种生理病理条件下phosphorylation蛋白组动态变化过程变得实际可行且意义重大。

图1. 定量phosphorylation蛋白组技术原理和phosphorylation信号调控的多种生物学过程。

      康成生物提供标准的定量phosphorylation蛋白质组学一站式服务，您只需提供保存完好的生物样品，康成专业的技术服务团队为您完成从样品制备到数据分析全部过程，并且提供完整的分析报告。如果酪氨酸phosphorylation是您的重点关注对象，我们还将提供pY深度富集和分析服务。

样品要求

注：酪氨酸phosphorylation需要更多的蛋白样品，详情请咨询康成生物技术人员。

实验流程

非标定量

案例展示
      运用高通量label-free定量phosphorylation蛋白组学技术分析极短时间（30s）和中等时间（10min）段内胰岛素刺激对蛋白phosphorylation水平的影响，据此来研究早期胰岛素信号传递过程和动态调控关系。
      运用高通量phosphorylation蛋白组学技术研究胰岛素在0-30s以及0-10min时间段内蛋白phosphorylation水平变化趋势（a）。对时间分辨的phosphorylation蛋白组数据进行聚类分析，能够发现胰岛素信号通路中的功能相关节点，粗体显示节点中的新成员（b）。

      根据蛋白phosphorylation水平变化模式，发现新的生物学现象：（a）两个相距很近的phosphorylation位点具有截然不同的phosphorylation模式，意味着不同的调控模式。（b）研究信号通路间的cross-talk。由Frs2介导的INSR通路与FGFR通路间的cross-talk。

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