Phenyl Bio-sep HP
产品名称： Phenyl Bio-sep HP
英文名称： Phenyl Bio-sep HP
产品编号： 13-45
产品价格： 0
产品产地： 西安
品牌商标： Bio-sep
更新时间： null
使用范围： null
西安保赛恒成生物工程有限公司
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1.外观：本品为白色球状凝胶,无嗅、无味、无肉眼可见杂质。
2.理化指标
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项 目
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指 标
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配 基
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R-OCH2-CH(OH)-CH2-O-C6H5
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基 质
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6% 交联琼脂糖
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形状
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球形
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粒径
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22~44μm
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蛋白质吸附容量（HSA）
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36mg/ml(高)；24mg/ml(低)
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最高流速(25℃)
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100KPa下≧150 cm/h*
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耐 压
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0.15 MPa
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耐 热
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pH水中120℃20min
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工作温度
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4~40℃
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pH适用范围
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2~14 (短时间 ，在位清洗)；3~13(长时间)
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化学稳定性
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以下溶液中稳定；
1mol/L NaOH;70%EtOH;30%异丙醇；0.5%SDS;6mol/L盐酸胍；
8mol/L尿素;3 mol/L(NH4)2SO4
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*柱子：内径50mm、柱长30cm。柱床高15cm,25℃, 流动相为0.1mol/LNaCl。
3．包装
产品以聚胺酯瓶密封包装，外贴标签，注明“品名、体积、颗粒大小、保质期、批号、生产日期、生产单位及地址” 等内容。所选用的包装应有利于保证产品质量、方便运输和贮存。
4. 运输
运输中应避免日晒、雨淋、重压，严禁与有毒、有害物品混运。
5. 贮存
产品应密封贮存在4℃~30℃（保存溶液为20% 乙醇+0.1M醋酸钠），通风、干燥、清洁的地方。不能冷冻。
用过的柱子贮存在4℃（20% 乙醇）。
6. 保质期：暂定5年。
7. 应用：苯基琼脂糖微球是一种疏水层析介质，利用样品中组分疏水性的不同进行分离。用于生物大分子的纯化分离。下面简要介绍介质的使用过程。
7.1 装柱
⑴ 让所有的材料和试剂达到室温。配制初始缓冲液（平衡液）和洗脱缓冲液。
⑵ 根据柱子大小取所需量的凝胶，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始缓冲液（按凝胶：缓冲液=3：1的比例）配成匀浆。匀浆作脱气处理。
⑶ 将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位（液面略高于滤膜），务必使底端无气泡。
⑷ 用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意勿使产生气泡。打开柱子出液口，使凝胶在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。
⑸ 打开蠕动泵，让缓冲液用使用时流速的1.33倍的流速流过，使柱床稳定。用2~3倍柱体积的缓冲液平衡柱子。
7.2 平衡
让平衡缓冲液以一定流速流过柱子，到流出液电导和pH不变。平衡缓冲液一般是高盐浓度的缓冲液，如0.02~0.05mol/L的PBS加1~2.5mol/L(NH4)2SO4等。
7.3 上样
⑴ 样品用平衡液配制，浑浊的样品要离心和过滤后上样。
⑵ 一般情况是让目标产品结合在柱子上，用平衡液洗去杂质，再选择一种洗脱液洗下目标产品。
⑶ 介质对样品组分吸附的程度取决于样品的疏水性质、流动相的离子强度和温度。盐浓度大、温度高或样品组分疏水性强，介质对组分吸附牢。
7.4 洗脱
疏水介质可用减小盐浓度进行洗脱。加表面活性剂或有机溶剂可加强洗脱。最常用的洗脱液是低盐浓度缓冲液，如0.02~0.05mol/L的PBS。
7.5 再生
一般用低盐浓度的缓冲液洗，洗10倍以上柱体积，接着用结合蛋白的平衡液洗到平衡，可再次使用。
若有失活蛋白质或脂类物质在再生时洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。
7.6 在位清洗
⑴ 对于以离子键结合上去的蛋白，可以用2M Nacl去除。
⑵ 对沉淀蛋白、对以疏水性结合的蛋白或脂类，可用1M NaOH 去除。
⑶ 对强疏水性结合的蛋白、脂类等，用4~10倍柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗，但要注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加，否则容易产生气泡。
清洗完毕后，用至少3倍缓冲液平衡柱子。
7.7 注意
在装柱、使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干，气泡进入。
7.8 去热源
用0.5M的氢氧化钠清洗柱子5~6小时或用0.1M的氢氧化钠24小时。或用以下方法步骤去除：
⑴ 2倍柱体积的70%乙醇
⑵ 2倍柱体积50mM Tris-Hcl pH7.5
⑶ 1倍柱体积4M尿素
⑷ 3倍柱体积的Tris缓冲液+0.1M Nacl
以上缓冲液都在无热源的双蒸水中配制
7.9 消毒
用0.5~1M NaOH室温下洗8~10倍柱体积，初始缓冲液平衡柱子。
7.10 灭菌
置介质于高压灭菌锅中120℃下20分钟。