产品内容：
提取液一：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体35mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加10mL双蒸水充分溶解。（配好后3天内使用完）
试剂三：液体5mL×1瓶，4℃保存。
产品说明：
乙醇酸氧化酶（EC1.1.3.15）是植物光呼吸代谢中的关键酶，也是光下合成草酸的关键酶，它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，对研究光呼吸代谢过程及其调控具有重要意义。
乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，乙醛酸和盐酸苯肼反应生成乙醛酸苯腙，在324nm 有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、紫外分光光度计、1 mL石英比色皿。
 
操作步骤：
一、酶液提取
按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。12000g， 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
二、测定操作
 
测定管
 样本（μL） 
50 
试剂一（μL） 
650 
试剂二（μL） 
200 
试剂三（μL） 
100 
充分混匀，立即于1mL 石英比色皿中测定324nm 处10s和190s 吸光值A1 和A2，△A=A2- A1
三、计算公式：
（1） 按照样本蛋白浓度计算
酶活单位定义：每毫克蛋白每分钟氧化1 nmol 乙醇酸所需的酶量为一个酶活力单位。
GO活性（nmol/min /mg prot）= ΔA÷（ε×d）×V反总÷(V样×Cpr) ÷T=392×ΔA÷Cpr
（2）按照样本质量计算
酶活单位定义：每克组织每分钟氧化1 nmol 乙醇酸所需的酶量为一个酶活力单位。
GO（nmol/min /g）= ΔA÷（ε×d）×V反总÷(W ×V样÷V样总) ÷T= 392×ΔA÷W
ε：乙醛酸苯腙毫摩尔消光系数：17L/mmol/cm；d：比色皿光径，1cm；V 反总：反应总体积，1mL；V 样：反应中样本体积，0.05mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W，样本质量，g；T：反应时间，3min
注意事项：
1. 测定之前进行预实验，若吸光值较高，请将样品用提取液进行适当的稀释再测定，并在计算公式中乘以稀释倍数。
2. 色素含量较高的样品，可在提取酶时加活性炭吸附。