人结肠上皮和肿瘤原代细胞cDNA
产品名称: 人结肠上皮和肿瘤原代细胞cDNA
英文名称:
产品编号: 4-7005
产品价格: 0
产品产地: 中国
品牌商标: 4-7005
更新时间: null
使用范围: null
北京鸿跃科技有限公司
- 联系人 :
- 地址 : 北京市海淀区上地1号院
- 邮编 :
- 所在区域 : 北京
- 电话 : 131****0105 点击查看
- 传真 : 点击查看
- 邮箱 : hycxbio@126.com
总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。齐氏生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备小鼠成骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。潜在的应用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA选择性剪接;<3>基因克隆与目标测序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白检测与蛋白质组学;<6>芯片研究与表达图谱。