一、质粒构建

质粒是使用广泛的基因操作工具，可以进行编码基因、microRNA、lncRNA的功能研究、启动子活性、转录因子及3’UTR调控研究等。

优势

1.  瞬时表达，导入细胞后约24 小时就可以观察到目的基因的表达；
2.  构建技术简单，因而成本也比较低。

质量标准

采用高纯度转染级试剂盒进行抽提，按照ISO9001标准进行严格的质量控制，提供最好标准的质粒给客户。

载体选择

提供完善的慢质粒产品体系，用于操作编码基因和非编码基因，如lncRNA、microRNA、circRNA。以下慢病毒载体可供您选择。

二、慢病毒包装


慢病毒属于逆转录病毒科,名称源自该种病毒长达数年的潜伏期,其中最为人所知的是人类免 疫缺陷病毒(HIV-1)。HIV-1 直径约 120nm,含两条正链 RNA,可有效的进入细胞核中,对分裂 期细胞及非分裂期细胞均具有很高的感染效率。慢病毒感染细胞后可将所携带的基因整合到细胞基 因组中,并且长时间持续稳定表达,同时能够随细胞分裂稳定遗传下去,因此成为导入外源基因的 有效工具。

慢病毒载体是以 HIV-1 为基础改造获得的基因治疗载体,通过去除致病基因,同时减少辅助质粒与载体质粒的同 源性,使慢病毒具有了滴度更高、生物安全性更好、导入外源片段的能力更强等特性。目前慢病毒系统已经广泛应用到基因过表达、RNA 干扰、miRNA 研究及基因敲除等功能研究的细胞实验和动物实验中。

舍为斯生物倾情推出慢病毒载体包装服务,包括 shRNA、miRNA、Cas9、基因过表达、诱导表达慢病毒载体包装服务以及慢病毒介导的稳定细胞系构建服务 。

1. 慢病毒包装服务

服务流程

慢病毒颗粒用途:

• 感染原代细胞；

• 制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株；

• in vivo 的基因操作；

• 转基因动物，特别是转基因大鼠的制备。

客户需要提供： 基因序列或 ID 及慢病毒表达载体; 若需我公司提供载体, 请另外说明。

交付内容： 1mL 慢病毒液、1mL 的慢病毒对照液,病毒滴度不少于 108TU/mL(Cas9 载体的病毒滴度不少于 107TU/mL);若需大量包装病毒液,请另外说明。

2. 慢病毒介导的非定点基因敲入细胞

基于慢病毒可将外源片段稳定整合入宿主细胞基因组的特点，该方法特别适合于构建基因表达或干扰的稳转细胞株。慢病毒感染法比质粒转染更容易操作，并且对各类细胞的转导效率都很高。舍为斯生物为科研用户提供慢病毒介导的非定点基因敲入细胞希工程改造服务。