武汉枢密脑科学技术有限公司
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一、慢病毒简介
慢病毒载体是由HIV的基础上改造而来,由于其结构和功能的特点已被广泛应用于基因治疗和细胞分子生物学研究领域。它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力,并可以将外源基因有效地整合到宿主基因组上实现长时间的稳定表达。在感染能力方面可以有效的感染神经元细胞,肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,实现外源基因的过表达或内源基因的敲降低并且可以结合CRISPR/Cas9系统实现靶基因的敲除。因此慢病毒载体有着广泛的应用前景。
枢密科技慢病毒采用三质粒系统转染293T细胞包装慢病毒颗粒,将Gag/Pol和载体分开,并且使用VSV-G的膜蛋白,包装出来的慢病毒宿主范围广,是基因转导的理想工具。
二、慢病毒包装流程
图1.慢病毒制备流程
三、慢病毒构建稳定细胞系
图2.稳定细胞系筛选流程
四、慢病毒应用案例
1、慢病毒度感染不同类型的细胞系
图3.慢病毒可以高效的感染各类肿瘤细胞、干细胞、原代细胞、和不分裂的细胞
2、慢病毒度感染小鼠脑组织
慢病毒可以携带光感基因(ChR2、eNpHR3.0等)感染神经元细胞,实现靶基因的高效表达。
图4. LV携带光敏基因的应用(Feng Zhang, Viviana Gradinaru., et al. Nature protocols,2010)
五、枢密优势
枢密科技开发出一系列专有技术和试剂,从病毒滴度、纯度、活性以及一致性等方面显著提升了慢病毒包装工艺水平。