哺乳动物细胞系转染实验全套服务
产品名称: 哺乳动物细胞系转染实验全套服务
英文名称: gene transfection
产品编号: 002
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特点:使用转染试剂进行细胞转染实验,高效转染大多数哺乳动物细胞系及肿瘤细胞。采用纳奥生物自主研发的ImagenFect荧光转染试剂,可以进行高效、低毒,可荧光示踪的转染实验。根据客户需求,可提供相应DNA、siRNA的设计,从培养细胞、实验操作、数据论证到撰写论文一条龙服务,并提供SCI论文发表指导。
应用范围:
1. 瞬时转染,外源基因不整合到宿主染色体中,一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,在转染后24-72小时内(依赖于各种不同的构建)分析结果,可用一些报告系统如荧光蛋白,β半乳糖苷酶等来帮助分析转染结果。
2. 稳定转染,外源DNA既可以整合到宿主染色体中,也可能作为一种游离体(episome)存在。尽管线性DNA比超螺旋DNA转入量低但整合率高。外源DNA整合到染色体中概率很小,大约1/104转染细胞能整合,通过一些选择性标记,如来氨丙基转移酶(APH;新霉素抗性基因),潮霉素B磷酸转移酶(HPH),胸苷激酶(TK)等反复筛选,得到稳定转染的同源细胞系。
3. RNA干扰,基因沉默,转染siRNA、dsRNA等进入细胞,抑制细胞中特定蛋白的表达,随后提取细胞蛋白,用Western实验等方式来分析蛋白表达量,从而判断基因敲除效率。
图2 ImagenFect 转染FITC标记siRNA至SKBR-3乳腺癌细胞动态转染荧光示踪过程。(红色为ImagenFect纳米粒子,绿色为siRNA分子)
样本要求:提供足量的细胞、目的基因或者告知细胞系种类、目的基因序列
服务周期:根据具体项目需求确定,瞬时转染1周,RNA干扰2周,稳定转染1-2个月。
费用:根据具体服务项目协商签订科研服务合同。