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多肽组合化学技术-纤维载体法

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1.纤维载体法(Synthesizer on Cellulose)纤维素材料作固相载体,载体表面-OH联上连肽结构后将此种载体园片装内玻璃柱内,每柱载体片愈多,合成量愈大,将柱排列,每往合成一种抗原肽类似物,柱愈多产物种类愈多。缩合到各不相同的构件时,每柱单独反应。合成完毕去保护基最后分别裂解,得到制备量的产物。为快速粗筛,又发展了在纤维纸片上列阵式合成法。此法是将预制的活化羟基组份滴加至相互间隔1cm左右中的"氨基酸"上缩合,几小时后再依洗涤一脱保一洗涤一缩合等多次接肽循环。Frank将连肽结构HOCH2CC6H6 )- O-(CH2)2 )-CO一以0.3umol/cm2的取代密度与纤维表面-OH相连,多余-OHAC2O一封闭。正丙醛将第一个氨基酸先接到纸片(55*105cm2)上,然后用机械手吸管均匀吸保护氨基酸活化酯于相隔1cm氨基点上进行缩合反应(共布49),完成缩合后,再将纸浸泡于溶液中洗涤,乙酰化,脱保护,最后用乙醇洗涤,干燥纸片,如此循环直到接肽完成,去保护后直接进行ELISA活性分析,剪下具有活性的点或采用柱法,将100个纸片紧排于玻璃柱内[(15mm (c) X 300mm2],每柱载不同的保护氨基,然后进行常规Merrifield操作,即得较大量的活性抗原肽段, Frank用此完成了巨噬细胞病毒(cytmegalovirus,hcnv)免疫区城抗原决定族的分析。抗原肽