来源
用途
交叉反应性
抗体类型
HDAC5分子量
Mouse
WB, IP, IC, E
H, M, R
IgG1
～124kD
      WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IC, Immunocytochemistry; E, ELISA.
      H, human; M, mouse; R, rat.
      本HDAC5抗体(HDAC5 antibody，即Histone Deacetylase 5 antibody为进口分装，用经过适当修饰的人工合成的HDAC5氨基端一段多肽(aa 4-19)作为抗原制备而成的抗HDAC5小鼠单克隆抗体。克隆号为HDAC5-35。
      本HDAC5抗体识别的是总HDAC5(total HDAC5)，可以检测内源性的HDAC5，未发现和其它HDAC蛋白有交叉反应。
      染色质由重复的核小体(necliosome)构成，而核小体则包含了由Histone H2A，H2B，H3和H4各两个分子组成的八聚体和与该八聚体结合的DNA。组蛋白(histone)上的一些Lys位点，可以被乙酰化修饰，从而影响染色质的空间结构，最终影响该区域的基因转录调控。通常当组蛋白被乙酰化时，染色质处于相对松散的构象，此时转录因子可以结合到该区域促进相关基因的转录。反之，当组蛋白被去乙酰化时，染色质结构会变得相对致密，该区域相关基因的转录就会被抑制。组蛋白可以被多种乙酰化酶乙酰化，包括PCAF，p300/CBP，GCN5，SRC-1，TAFII250，BRCA-2和Patt1等。组蛋白去乙酰化酶包括HDAC(histone deacetylase)家族和Sirtuin家族(Sirt家族)。HDAC家族包括HDAC1，HDAC2，HDAC3，HDAC4，HDAC5，HDAC6，HDAC7，HDAC8，HDAC9，HDAC10和HDAC11。通常HDAC可以去乙酰化染色质中某些特定区域的组蛋白，导致该区域的染色质结构变得相对紧密，从而抑制该区域相关基因的表达。Class I HDAC包括HDAC1，2，3，8；Class II HDAC包括HDAC4，5，6，7，9，10。Sirtuin家族被称为Class III HDAC。Class IV HDAC只包括HDAC11。HDAC1，2，8主要定位在细胞核；而HDAC3则在细胞核和细胞浆都有分布，并且分布在膜结构上。Class II HDAC在特定条件下可以在细胞核和细胞浆之间穿梭(shuttle in and out)。HDAC在命名时被称为组蛋白去乙酰化酶，但事实上它们可以去乙酰化多种多样的蛋白。例如，HDAC6可以和微管(microtuble)结合，可以去乙酰化tubulin，Hsp90和cortactin等。目前发现大量的蛋白可以被乙酰化修饰，因此HDAC等乙酰化修饰酶被认为在基因转录调控、信号转导、生长发育、分化凋亡、代谢性疾病和肿瘤等多种生理病理过程中发挥重要作用。HDAC的抑制剂目前被认为是很有前景的肿瘤治疗药物。
      HDAC5具有组蛋白去乙酰化酶活性，可以和HDAC3一起被免疫共沉淀。HDAC5在肌细胞分化过程中起重要作用。HDAC5可结合肌细胞增强因子(myocyte enhancer factor-2，MEF2)蛋白的氨基末端结构域，抑制MEF2下游基因的表达。在多种癌细胞中过表达HDAC5，会导致非P53依赖的生长抑制和细胞凋亡。
      配套提供了Western一抗稀释液，可以用于Western检测时的一抗稀释。
      建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整)：
WB
IP
IC
E
1:1000
1:100
1:200
1:5000
      本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。
包装清单：
产品编号
产品名称
包装
AH392-1
HDAC5抗体(小鼠单抗)
20μl
AH392-2
Western一抗稀释液
20ml
—
说明书
1份
保存条件：
      HDAC5抗体-20℃保存，Western一抗稀释液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存，长期不使用可以考虑-20℃保存，但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项：
      在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
      回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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1. Western检测：
A. 按照1:1000用提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
B. 把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜或室温缓慢摇动2小时，确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。
C. 回收稀释的一抗，4℃保存以备下次继续使用。
D. 按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。
2. 免疫染色：
可以使用生产的免疫染色一抗稀释液(P0103)稀释抗体，使用后注意回收稀释好的一抗，
3. 其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。​