生化代谢检测

本检测指标包括一氧化氮NO、ADP定量检测、ATP定量检测、ADP+ATP比率分析、DNA损伤定量分析、NAD+NADH定量、NADP+NADPH定量、钙离子(Ca)含量、铁离子含量、镁离子含量等检测。

ADP是ATP脱磷酸后的产物，增加一个磷酸基团即转变成ATP。在ATP与ADP之间的转化过程中，多种磷酸(酯)酶、磷酸化酶以及激酶均参与其中。ADP在体内通常储存于血小板中，在释放后可以与各种嘌呤能受体发生作用。ADP的水平调控着多种参与中间代谢的酶分子。ADP转换成ATP通常发生在线粒体/叶绿体，当然胞浆中也经常发生类似的转换。传统的方法是，使用荧光素酶/荧光素介导的方案来检测ADP的水平。然而，荧光素酶系统不是很稳定，并且其检测设备也不是很普遍，这在一定程度上限制了实验室里ADP的检测。

本检测基于ADP比色法检测ADP，将样本内的ADP转化成ATP和丙酮酸，丙酮酸可以用比色法(λmax = 570 nm)定量。该方法简捷、敏感、稳定，并适用于高通量分析，其在生物样本内的检测灵敏度可以达到1μM ADP。

ATP是生物代谢系统的能量货币。几乎所有的能量依赖性生化反应都要利用储存在ATP高能磷酸键里面的化学能。ATP只在线粒体中合成，许多遗传疾病都会影响线粒体中ATP的合成反应。本检测基于ATP比色法检测ATP，操作简易方便。将甘油磷酸化后会生成一种产物，该生成物能通过测定比色法（λmax=570 nm）定量。其检测技术的灵敏度可以达到50 picomol（1μM）。

NADH，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，,还原型辅酶Ⅰ。N指烟酰胺，A指腺嘌呤，D是二核苷酸。葡萄糖代谢时直接经代谢所产生的ATP是十分的少的，而代谢产生的NADH或FADH2经由一个电子传递与氧化磷酸反应可产生大量的ATP。NADH分子是线粒体中能量产生链中的控制标志物。NADH水平的上升指示代谢失衡的出现。监视NAD/NADH的氧化还原状态是表征活体内线粒体功能的最佳参数。涉及到氧化还原的反应都与之有关，比如呼吸作用，光合作用，尤其是NADH。因此NAD/NADH水平的监控是能量传递、细胞核组织氧化还原态等研究的主要兴趣点。

本实验可以检测哺乳动物样本细胞内NADH、NAD的水平以及相互的比率。该NADH/NAD定量试剂盒内的NAD循环酶混合物特异性的识别酶循环反应中NADH/NAD，因此无需在分析前从样本内纯化NADH/NAD。并且NADH/NAD定量分析试剂盒只特异性的检测NADH/NAD，不会与NADP和NADPH有反应。通过提供的NAD循环酶混合反应体系可以大大提高检测的灵敏度和特异性。最终样本内NADH/NAD的含量可以通过与标准样相比而获得。

NADPH是一种辅酶，还原型辅酶Ⅱ(NADPH)，学名烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，在很多生物体内的化学反应中起递氢体的作用，具有重要的意义。还有NADP，是其氧化形式。常常存在于糖类代谢过程中。来自于维生素PP。NADPH通常作为生物合成的还原剂，并不能直接进入呼吸链接受氧化。只是在特殊的酶的作用下，NADPH上的H被转移到NAD+上，然后由NADH进人呼吸链。 NADPH是在光合作用光反应阶段形成的，与ATP一起进入暗反应，参与CO2的固定。NADPH的形成是在叶绿体基质中完成的。

本实验可以灵敏检测哺乳动物样本细胞内NADPH、NADP的水平以及相互的比率。组分中德酶体系可特异性的识别酶循环反应中NADPH/NADP，因此无需在分析前从样本内纯化NADPH/NADP。并且NADPH/NADP定量分析试剂盒只特异性的检测NADPH/ NADP，不会与NAD和NADH有反应。通过提供的循环酶反应可以大大提高检测的灵敏度和特异性。最终样本内NADPH/NADP的含量可以在酶标仪或读板仪OD450nm处读取获得。