一氧化氮(NO)测定试剂盒 (A012)-其它服务-技术服务-生物在线
武汉云克隆诊断试剂研究所
一氧化氮(NO)测定试剂盒 (A012)

一氧化氮(NO)测定试剂盒 (A012)

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产品名称: 一氧化氮(NO)测定试剂盒 (A012)

英文名称: Nitric Oxide Kit A012

产品编号: IS100

产品价格: 1

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[预期应用]
本试剂盒运用硝酸还原法定量测定血清、胃液、尿液、细胞培养上清或其它相关生物液体中一氧化氮(NO)含量。


[需自备的设备及试剂]
1、分光光度计(比色测定波长为550nm),0.5厘米光路玻璃试管             

2、恒温水浴箱或恒温箱(孵育温度:37℃和90~100℃)             

3、台式离心机             

4、微量移液器及吸头           

5、漩涡混合仪   ,玻璃棒             

6、蒸馏水或去离子水



[试剂盒的储存及有效期]
1、试剂1:-20℃或低于-20℃可保存3个月。使用前将试剂置于37℃或室温下充分溶解。             

2、试剂2:-20℃或低于-20℃可保存3个月。使用前将试剂置于37℃或室温下充分溶解。             

3、试剂3:室温保存6个月。            

4、试剂4:室温保存6个月。             

5、试剂5:避光保存。             

6、试剂6:避光冷藏保存。如果颜色变成深褐色,则不能使用。             

7、试剂7:室温保存6个月。             

8、10mmol/L标准:-20℃或低于-20℃可保存6个月。



[试剂准备]
1、混合试剂制备:混合试剂1和试剂2的比例为1:1,根据实验需求量配置。完全混合后,需在24小时内使用。

2、试剂5:粉末×1瓶,使用时,加入20ml(50T)或10ml×(25T)90OC~100℃热蒸馏水完全溶解后,避光储存。试剂5为过饱和溶液,最好加入23ml(50T)/11.5ml(25T)热蒸馏水(考虑热膨胀),同时水浴加热,并用玻璃棒搅拌,使其完全溶解。配好的试剂5存放时可能会出现晶体,使用前请加热并搅拌,使其完全溶解。

3、试剂6:粉末×1瓶,使用时加入8ml(50T)或4ml(25T)双蒸馏水溶解。避光冷藏。如果颜色变成深褐色,请不要使用。

4。显色剂:根据实验需求量配置(配置好的显色剂,可在1个月内使用)。试剂5、试剂6和试剂7的混合比例为2.5:1:1。可存放在40ml干净的方形瓶中,避光。低温存放可能会出现晶体。再次使用时,100℃水浴加热,反复摇动使其完全溶解。

5。100μmol/L标准工作液配制:取0.1ml标准品,加入双蒸馏水,直至体积达到10ml(100倍稀释),充分混合,浓度为100μmol/L标准工作液。准备后需立即使用。



[标本处理]
1、液体样品(如血清、胃液、尿液、细胞培养上清和其他生物液体等)NO测定:

预处理:根据实验方法。

2、组织样品NO测定

预处理:根据实验方法。




[实验原理]
NO化学性质非常活泼,易转化为硝酸盐(NO3-)和亚硝酸盐(NO2-),NO2-也可转化为NO3-。本试剂盒采用硝酸还原酶特异地将NO3-还原成NO2-,通过测定OD值计算NO含量。

[样本值]
1、推荐采样量:

牛血清:300μL

绵羊血清:300μL

大鼠和小鼠血清:100μL

兔血清:100μL

10%组织匀浆:500μl

细胞裂解液:500μL

细胞培养上清液:100μL
[说明]
1、试剂1、试剂2和标准需避免反复冻融。如果要分次实验(>3次),那么请将试剂1、试剂2和标准分装储存,根据每次实验的使用量分装及配置试剂。制备好的显色剂需避光。

2、样本不立即用于实验(如血清、血浆、组织等),可置于-70℃或低于-70℃保存。冻存样品可在半年内使用。

3、所有试剂配制和空白管需使用不含NO2-的双蒸水或三蒸水(试剂盒有双蒸馏水)。

4、完成反应和离心后,取上清时避免吸入沉积物,否则OD值会大幅度增高,严重干扰结果的有效性。

5、试管选择:

a、建议使用一次性塑料试管。

b、若要使用玻璃试管,请将其浸泡在洗涤剂溶液中超过半小时,煮沸0.5~1小时,小心刷洗,用自来水冲洗15~20次,弃水,用蒸馏水冲洗1~2次,烘干后使用。



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