动物品种

SPF级SD大鼠

动物性别

雄性

动物周龄

250g左右

造模方法

大鼠饲养至体重350g以上开展实验。

(1)麻醉：实验动物用异氟烷气麻。

(2)备皮：麻醉生效后，用电动剃毛器剃去实验动物腹部以下所有毛发，术区严

格碘伏消毒，实验动物仰卧固定于实验台，铺一次性无菌巾；

(3)使用趾长屈肌腱进行前交叉韧带重建，趾长屈肌腱分离：

a.同侧肢体于脚踝内后侧作一0.5cm小切口分离趾长屈肌腱近端(注意与胫骨后

肌腱相区别）；

b.用眼科镊挑起趾长屈肌腱近端，当牵拉韧带时大鼠脚趾将屈曲，以此证明分离

的是趾长屈肌腱，用4-0号缝线分离；

c.于足底大脚趾后内侧作另一0.5cm小切口分离趾长屈肌腱远端；

d.注意仔细与肌腱周围血管分离，利于减少出血；

e.同样当用眼科镊挑起趾长屈肌腱远端时大鼠脚趾将屈曲，此时用眼科剪或刀片

离断肌腱;

f.再于脚踝内后侧小切口牵拉4-0号缝线，将肌腱牵拉出来，再利用眼科镊将肌

腱上的肌肉分离，利用止血钳钳夹肌腱远端，可顺利拉出肌腱；

(4)获得的韧带长度可达约4.0厘米(图3—5)；剔除多余的肌肉组织后，用4-0号

缝线作为牵引线，打单结固定肌腱近端(近端更易于通过骨隧道)，将准备好的肌腱浸泡于含抗生素的生理盐水中，备用；

3.2大鼠前交叉韧带重建模型的建立

(1)于大鼠膝关节髌骨内侧缘作一约1.5厘米纵行切口；逐层切开皮肤，用眼科剪延长切口并分离皮下组织及关节囊，屈曲膝关节，充分暴露前交叉韧带，用剪刀剪断韧带；

(2)以直径1.5mm的克氏针分别以正常前交叉韧带胫骨和股骨附着点为标志，钻取胫骨和股骨隧道，电钻打孔时注意滴加生理盐水降温；

(3)用直针引导肌腱近端牵引线，将趾长屈肌腱自下骨道外口穿经胫骨和股骨骨

隧道引出；

(4)使用4-0号缝线8字缝合法，将移植物固定于股骨近端和胫骨远端隧道口周

围的骨膜或其他软组织；

(5)  用注射器抽取含抗生素生理盐水，仔细止血、充分冲洗膝关节腔后，复位髌骨，用6-0号缝线逐层缝合关节囊、皮肤(细缝线有利于减少对皮肤刺激，降低动物啃咬缝线)，碘伏涂抹伤口；

(6)  术后笼养，自由活动，术后前三天，每天给大鼠膝关节伤口换药，前3天给予肌注青霉素(8U/kg)抗感染，另外还要定期通过敲打鼠笼的方式，来增加术后 大鼠活动量，以防止术后膝关节粘连情况的发生。

成模鉴定

取材：术后4周，将大鼠处死，完整取下大鼠术侧下肢的胫骨和股骨，剔除周围皮肤肌肉和软组织，保留关节内外移植物，取下股骨-韧带-胫骨复合体，10%福尔马林固定，室温保存。

(1) MircoCT检测：用于测量骨隧道直径变化、隧道内新形成组织的矿化程度、密度和骨隧道周围骨质变化；

(2) 病理组织学检查：做完Micro CT，组织脱钙，修整标本，分别留取近膝关节处胫骨和股骨各1cm，做石蜡包埋和切片，HE染色，光镜下主要观察骨隧道与移植肌腱结合部的交界组织的病理改变。

造模周期

5周

后续检测指标建议

生物力学检测

a.小心剔除膝关节中除重建的前交叉韧带之外的所有肌肉，软组织和韧带，解除重建韧带两端固定缝线避免影响生物力学检测；

b. 测试仪行生物力学检测，将股骨-肌腱-胫骨复合体置于试验夹具中进行最大载荷拉伸试验，详细观察并记录将重建的前交叉韧带从股骨或胫骨的骨隧道中拉出或将韧带拉断的最大加载负荷，并计算其刚度。

备注

文献中很多用大动物造模