基因表达分析服务-荧光定量PCR服务

服务简介：
       基因表达指细胞在生命过程中，把储存在DNA序列中遗传信息经过转录和翻译，转变成具有生物活性的蛋白质分子，从而行使各类功能的过程。一般活跃表达的基因约占基因组中所包含基因的10-15%，而研究者更将目的片段进行过表达或表达抑制。分析这些基因的表达情况成为生命科学研究中重要的环节。英为信生物为客户提供不同的技术手段，如荧光定量PCR、转录组测序（RNA-seq）、基因芯片等，可以在不同层面研究各种条件下各类样本中的RNA，以及与表达调控有关的DNA的变化。

原理简介：
       实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，通过荧光染料或荧光标记的特异性探针，对PCR产物进行标记跟踪，利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应进程中每一个循环扩增产物量的变化，最后通过Ct值和标准曲线的关系，并结合相应的软件对未知模板进行相对定量或绝对定量分析的方法。
 
服务内容：
荧光定量PCR（染料法或探针法）：
（1）常规荧光定量PCR:   

• 动物样本，植物样本、细菌与真菌样本的基因表达量分析
• 表达谱芯片、转录组测序实验结果验证
• RNAi干扰目的基因实验效果的验证

（2）microRNA荧光定量PCR:

• microRNA芯片、microRNA测序实验结果的验证

（3）noncodingRNA荧光定量PCR:

•  人、大小鼠的各种组织中不同长度的非编码RNA表达量的分析

（4）其它应用：         

• 基因组中特定基因的拷贝数变化分析，或微生物总数的绝对定量
• 病毒和病原菌定性检测、生物品种定性鉴定
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• 大鼠肌肉组织TP53基因扩增曲线图（含工作曲线）
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• 大鼠肌肉组织TP53基因融解曲线图
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• 实验流程：        
  
  • 目的基因分析与引物设计（包括染料法或探针法选择）
  • RNA或microRNA提取
  • 逆转录实验
  • Realtime PCR
  • 相对表达量或绝对表达量分析
  品质保证：         
  
  • 全程采用国际品牌试剂与耗材进行实验分析
  • 每个环节严格质控，包括引物设计、PCR条件优化、特异性融解曲线、模板质量等
  • 目的基因与内参基因均为国际标准3复孔实验，复孔Ct值均一性保证

小鼠肺组织Muc5AC基因扩增曲线图

小鼠肺组织Muc5AC基因融解曲线图