双荧光素酶报告基因检测--启动子活性和转录因子结合位点分析实验
产品名称: 双荧光素酶报告基因检测--启动子活性和转录因子结合位点分析实验
英文名称: 启动子活性和转录因子结合位点分析实验
产品编号: yb-15
产品价格: 8500
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上海英拜生物科技有限公司
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启动子活性和转录因子结合位点分析实验
启动子(Promoter)位于结构基因上游,其长度从100bp到2000bp不等,转录起始时识别和结合RNA聚合酶并启动转录,本身并不被转录。启动子影响基因表达的起始时间和表达程度,就像“开关”,决定基因的活动。研究启动子有助于研究基因在生长、发育和疾病过程中的调控机制。启动子的活性检测和转录调控研究,主要通过对启动子全长进行一系列截短,同时对潜在的转录因子结合位点进行定点突变,构建启动子全长及系列截短载体,最后进行双荧光素酶检测比较其活性变化,从而确定核心启动子区和转录因子结合位点,或寻找特定条件下的关键转录因子。
英拜生物启动子活性分析实验流程:
1.启动子系列截短突变载体的构建
2.目的片段载体双酶切
3.PGL3-basic载体双酶切
4.目的片段与PGL3-basic载体的连接
5.连接产物的转化
6.阳性克隆筛选及测序
7.荧光素酶检测
8.整理分析数据,得出结论。
实验报告:
包括载体构建过程,鉴定记录,测序报告,细胞转染,荧光检测。
不同截短突变启动子相对于未共转启动子均一化后荧光素酶活性相对活性的计算结果