中科院抗体研究中心 www.antibodyweb.com

张东  02164759190    dzhang@imb.sh.cn

制备多克隆抗体
制备多克隆抗体（2 至 3 个月）

多克隆抗体订制服务

实验动物：2 只大耳兔；
 顾客方需提供抗原样品 > 5 mg,纯度 > 90 .抗原经 SDS-PAGE 检测。若达不到要求的抗原顾客仍坚持启动项目，风险由顾客承担；
 多次免疫兔子，每次测定效价（ELISA），数据最后一并提供给顾客；
 提供最后一次免疫的抗血清 20 ml，若量需要增加，收费另外增加；若需要提供免疫前的血清，需预先说明，并相应增加费用 ￥ 300，一般提供 1 至 2 ml；
 验收方式：通过 ELISA 方法进行检验；
 验收标准：制备的多克隆抗体与客户方提供的抗原样品有特异性结合，同时抗体特异性只针对客户方提供的抗原样品做出保证；
 如需做小鼠或其他动物的多克隆抗体，请与我们联系，收费标准另议。
 以上收费仅限于提供兔子抗血清。

最终提供：20 ml兔子的抗血清，效价在1：10，000以上，并给出相应的 ELISA 鉴定报告。制作及运输过程中，抗血清均在 -20 ℃ 保存。

纯化多克隆抗体（1周）
纯化方法多克隆抗体纯化（饱和硫酸氨法）
多克隆抗体纯化（Protein G法）
多克隆抗体纯化（抗原特异性纯化法）

利用 Protein G 法纯化多克隆抗体的得率在14 mg 蛋白 / 1 ml 抗血清的水平；
利用亲和纯化法纯化多克隆抗体的得率在 25 mg 蛋白 / 20 ml 抗血清的水平；
选择抗原特异性纯化法的顾客，每纯化 20 ml 的抗体，需提供 10 mg 抗原。


制备单克隆抗体
制备单克隆抗体（ 4至 6 个月）
杂交瘤细胞株制备服务
在实验过程中为尽量减少被传染性病菌感染的危险，同时又要尽可能增强抗原的免疫反应，我们采用无特殊病原体小鼠 ( SPF mouse )；同时为了达到最佳的免疫效果，在融合前，免疫动物需要较长的时间，因此杂交瘤细胞株的制备需要 4 至 6 个月的时间。为降低顾客方实验风险，我们分二个阶段制备杂交瘤细胞株，顾客方需分步付费：

 第一阶段：免疫小鼠
设计实验方案；
 实验动物：5 只 6 至 8 周龄 BALB / C 小鼠；
 顾客方需提供抗原样品 > 7 mg,，纯度 > 90 .抗原经 SDS-PAGE 检测。若达不到要求的抗原顾客仍坚持启动项目，风险由顾客承担；
 每只 BALB / C 小鼠至少免疫数次，每次免疫后均用 ELISA 测定抗体效价；
 验收方式：通过 ELISA 方法进行检验；
验收标准：免疫后的小鼠血清与客户方提供的抗原样品有特异性结合，抗血清效价在 1：10,000 以上
 顾客方认可后，杂交瘤细胞珠进入第二阶段制备，否则合作终止。

第二阶段：分泌抗体的杂交瘤株的建立
 免疫细胞与骨髓瘤细胞融合，通过选择和筛选以及克隆化，最终提供 2 至 3 个克隆的杂交瘤，以及相应的杂交瘤克隆培养物上清液或少量腹水，并附杂交瘤克隆建株过程的总结报告（包括融合、克隆过程，抗体效价以及抗体免疫球蛋白克隆的亚型）。
 验收方式：通过 ELISA 方法进行检验；
 验收标准：提供的杂交瘤培养物的腹水（或上清液）与顾客方提供的抗原样品有特异性结合，同时抗体特异性只针对客户方提供的抗原样品做出保证。

最终提供：2 至 3 株杂交瘤细胞株和少量腹水（或上清液），并给出相应的鉴定报告（包括单抗的亚型）。