DNA甲基化(BSP/MSP/qMSP)

DNA甲基化是一种表观遗传修饰，它是由DNA甲基转移酶（DNA methyl-transferase, Dnmt）催化S-腺苷甲硫氨酸作为甲基供体，将胞嘧啶转变为5-甲基胞嘧啶（mC）的一种反应，在真核生物DNA中，5-甲基胞嘧啶是唯一存在的化学性修饰碱基。CG二核苷酸是最主要的甲基化位点，它在基因组中呈不均匀分布，存在高甲基化、低甲基化和非甲基化的区域，在哺乳动物中mC约占C总量的2－7％。一般说来，DNA启动子区甲基化会抑制基因的表达。DNA的甲基化对维持染色体的结构、X染色体的失活、基因印记和肿瘤的发生发展都起重要的作用。

利用重亚硫酸盐使DNA中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶，而在适当实验条件下甲基化的胞嘧啶保持不变，再进行PCR扩增，甲基化的位点可以被当作一个C/T的SNP来处理；可用直接测序法来判断是否CpG位点发生甲基化。

※ 服务流程

1、根据待分析的基因组区域信息设计相应引物

2、基因组DNA的提取，利用琼脂糖凝胶电泳明确所提基因组DNA的纯度

3、亚硫酸盐修饰基因组DNA：双链DNA变性解链后，在HSO₃-作用下，C若已有甲基化则无此改变；若DNA CpG Island若无甲基化，则序列中的改变为C→U，CG→UG

4、修饰后DNA纯化回收，并进行引物特异性的PCR

5、BSP,对PCR产物进行测序并且与未经处理的序列比较

6、MSP,对PCR产物进行电泳分析

7、qMSP,对于验证的CpG Island，进行稳定的高度定量和灵敏的甲基化检测分析

※ 客户提供

待分析的基因组区域信息；用于提取基因组DNA的组织材料

※ 优势服务

1、根据待分析的基因组区域信息设计相应引物，特异性位点的DNA甲基化的检测结果

2、可避免样本偏差，在重亚硫酸盐转化步骤后得到更高的定量结果的数据质量

3、引物设计运算法专为甲基化研究而优化，可提供更快的引物设计，及更高的PCR成功率