河北博海生物工程开发有限公司
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①石蜡包埋的切片的预处理常规脱蜡脱水 ②用蛋白酶K(20μg/ml溶于Tris/HCl中,Ph7.4~8.0)室温孵育15~30分钟。37度孵育15分钟。PBS洗2次 ③标记:PBS冲洗2次,擦干样品周围的水,滴加50ul的TUNEL反应混合溶液,在湿盒中37℃孵育60分钟(为防止蒸发和保证TUNEL 反应混合物均匀分布,在孵育过程中加盖盖玻片)。PBS冲洗3次,至此样品可在荧光镜下分析结果。 ④信号转化和分析:擦干样品周围的水分,加入50ul转化剂-POD,在湿盒中37℃孵育30分钟(为防止蒸发和保证转化剂-POD均匀分布,在孵育过程中加盖盖玻片)。PBS冲洗3次,加入50~100μl DAB底物溶液,室温孵育10分钟,PBS冲洗3次。 ⑤苏木素复染细胞核,封片,在光镜下图象分析:选择有意义的组织相,经登录、编号、采集、分析、读取数据、最后存盘。 ,,