蔗糖酶测定试剂盒
产品名称: 蔗糖酶测定试剂盒
英文名称: Sucrase Assay Kit
产品编号: BC0500
产品价格: 0
产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三
品牌商标: Solarbio
更新时间: 2024-11-16T14:28:57
使用范围: null
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产品内容:
提取液:液体30mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 支 ,4℃保存,用时加入2.5mL 蒸馏水充分溶解;用不完的试剂4℃可保存一周;
试剂三:液体7mL×1 瓶,常温保存;
标准品:粉剂×1 支,10mg无水葡萄糖,4℃保存,用时加入1mL 蒸馏水充分溶解。
产品说明:
蔗糖酶(EC 3.2.1.26)是碳水化合物消化吸收的关键酶之一,能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收。
本试剂盒采用3.5-二**水杨酸法测定蔗糖酶催化产生的还原糖的含量,由此可得出蔗糖酶水解速度。其原理是3.5-二**水杨酸与还原糖共热被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内还原糖的量和反应液的颜色深度成正比。此法操作简便、迅速、杂质干扰较小。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、玻璃比色皿、研钵、冰、浓硫酸(不允许快递)、蒸馏水。
操作步骤:
一、 样品测定的准备:
1.样品的准备:
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10 的比例(建议称取约0.1g 组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2.标准品的制备:
将标准品用蒸馏水稀释至1、0.8、0.6、0.4、0.2mg/mL。
二、加样表和测定步骤:
试剂名称(μL) | 对照管 | 测定管 | 标准品 |
试剂一 | 50 | 50 | 50 |
蒸馏水 | 50 |
|
|
样本 | 100 | 100 |
|
标准品 |
|
| 100 |
试剂二 |
| 50 | 50 |
置于25℃准确水浴10min | |||
试剂三 | 100 | 100 | 100 |
混匀, 100℃水浴10min 左右(盖紧,防止水分散失),冷却至室温 | |||
蒸馏水 | 700 | 700 | 700 |
混匀,540nm 蒸馏水调零,测定各管吸光值,ΔA=A 测定-A 对照,每个测定管设一个对照管。
标准曲线的建立:以标准品的浓度为x轴,540nm下的吸光度(A标准管-A对照管)为y轴,绘制标准曲线。
三、蔗糖酶活力计算:
1、 根据标准曲线,将∆A(y)带入公式中计算出x值(mg/mL)。
2、 按照蛋白浓度计算
单位定义:每mg 组织蛋白每分钟催化水解1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
蔗糖酶活力(μg/min/mg prot)=(1000×x×V1)÷(V1×Cpr)÷T=100×x÷Cpr
3、 按样本鲜重计算
单位定义:每g 组织每分钟催化水解1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
蔗糖酶活力(μg/min/g 鲜重)= (1000×x×V1)÷(V1×W)÷T=100×x÷W
1000:1mg/mL=1000μg/mL; V1:加入反应体系中样本体积,0.1mL;V2:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,10min; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g。
BC0340 糖原含量检测试剂盒 可见分光光度法 50管/48样
BC0345 糖原含量检测试剂盒 , 微量法 100管/96样
BC2450 植物组织果糖(FT)含量检测试剂盒 可见分光光度法 50管/48样
BC2455 , , 植物组织果糖(FT)含量检测试剂盒 微量法 100管/96样
BC2540 纤维素酶(CL)检测试剂盒 可见分光光度法 50管/24样
BC2545 纤维素酶(CL)检测试剂盒 微量法 100管/48样
BC0330 海藻糖含量检测试剂盒 可见分光光度法 50管/48样
BC0335 海藻糖含量检测试剂盒 微量法 100管/96样
BC2510 海藻糖酶检测试剂盒 可见分光光度法 50管/24样
BC2515 海藻糖酶检测试剂盒 微量法 100管/48样
BC2520 山梨醇含量检测试剂盒 可见分光光度法 50管/48样
BC2525 山梨醇含量检测试剂盒 微量法 100管/96样
BC2530 山梨醇脱氢酶检测试剂盒 紫外分光光度法 50管/48样
BC2535 山梨醇脱氢酶检测试剂盒 微量法 100管/96样
BC0230 还原糖含量检测试剂盒 可见分光光度法 50管/24样
BC0235 还原糖含量检测试剂盒 微量法 100管/48样
BC2490 血糖含量检测试剂盒 可见分光光度法 50管/48样
BC2495 血糖含量检测试剂盒 微量法 100管/96样
BC2500 葡萄糖含量检测试剂盒 可见分光光度法 50管/48样
BC2505 葡萄糖含量检测试剂盒 微量法 100管/96样
BC0030 植物可溶性糖含量检测试剂盒 可见分光光度法 50管/48样
BC0035 植物可溶性糖含量检测试剂盒 微量法 100管/96样
北京索莱宝科技有限公司 李雪
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