Edman测序是一种用于测定蛋白质或多肽中氨基酸序列的化学方法，广泛应用于分析多肽和蛋白质的氨基酸序列。该技术由Pehr Edman在20世纪50年代开发，通过步进的方式逐步去除并鉴定多肽链N端的氨基酸单体，是蛋白质测序领域的突破。Edman测序的基本原理是以苯基异硫氰酸酯（PITC）与多肽链N端氨基酸的反应产物在碱性条件下形成一种环化的产物，然后在酸性条件下进行环化物的解离，最终生成一种可被鉴定的PTH-氨基酸。这种方法通过循环剥离和鉴定多肽链的每一个N端氨基酸，逐步测定整个蛋白质的序列。在蛋白质结构研究、药物设计和生物技术开发中，Edman测序已成为理解和解析蛋白质序列的不可或缺的工具。在实际应用中，Edman测序通常用于确认新的蛋白质序列或验证已知序列的准确性，特别是在基因组学数据和蛋白质表达系统之间的数据整合中。

一、技术流程

在进行Edman测序时，研究人员需要掌握一套标准化的方法和技术流程，以确保测序的准确性和效率。以下是Edman测序的几个关键步骤：

1、样品制备

蛋白质需要被提纯，并且通常会被酶解成较小的多肽片段，以增强Edman降解的效率。常用的酶包括胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶。样品的纯度直接影响测序的成功率，因此高效的纯化步骤是必不可少的。

2、反应过程

首先，多肽的N端氨基酸与PITC反应，形成PITC-衍生物。随后，该衍生物在酸性条件下被环化并切离，从多肽链中释放出一个PTH-氨基酸，从而使多肽链缩短一个氨基酸单位。

3、产物分析

通过高效液相色谱（HPLC）等分离技术，分离并鉴定PTH-氨基酸。每次循环都能确认一个新的N端氨基酸，重复进行以解析整个序列。

二、Edman测序的技术优势

1、高精确性

Edman测序能够提供氨基酸序列的准确信息，尤其适用于小蛋白质或多肽的序列分析。

2、单一检测

与基于质谱的测序技术相比，Edman测序能够在无需参考数据库的情况下获取初步的序列信息，这对于新发现蛋白质尤其重要。

3、低背景干扰

由于其基于化学反应的特性，Edman测序的背景噪声较低，适合于高纯度样品的序列分析。

三、Edman测序的注意事项与常见问题

虽然Edman测序是一个成熟的方法，但在实际操作中仍需注意以下几点，以确保实验的顺利进行：

1、样品质量

样品的纯度和完整性是成功测序的前提。任何污染物或降解都会干扰反应过程，导致错误的序列读取。

2、循环次数限制

由于每次循环的效率不是百分之百，因此Edman测序通常适用于50个氨基酸以内的多肽序列。超过这一长度，测序的准确性可能会受到影响。

3、N端遮挡问题

如果多肽链的N端被化学修饰或被阻挡，则Edman测序无法进行。因此，在样品制备前需特别注意N端的检查和处理。

百泰派克生物科技提供全面的Edman测序服务，以其高效、精确的测序能力赢得了广泛客户的信赖。我们拥有专业的技术团队和丰富的经验，能够针对客户的具体需求提供定制化测序方案，为您的科研项目提供最可靠的支持。选择百泰派克生物科技，您将体验到高质量的Edman测序服务，加速您的科学研究进程。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

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