AgPath-ID™ One-Step RT-PCR Kit试剂盒——简便高效的RNA病源RT-PCR检测试剂盒 特点： 1）高灵敏，高特异的稳定的RNA病源RT-PCR检测试剂盒 2）简便快速，1小时内可以获得检测结果 3）组分很少，反应组装方便 AgPath-ID™ One-Step RT-PCR Kit是Ambion公司专门设计用于灵敏、高效地扩增并检测病源RNA，整个检测利用快速、单管的实时定量RT-PCR反应。AgPath-ID™试剂盒包含所有RT-PCR所需的反应buffer与酶等组分。您所要做的仅仅是添加PCR引物与TaqMan®探针（可选）。AgPath-ID™试剂盒为使用TagMan法实时定量PCR检测设计，但是整个buffer与酶的组成完全兼容使用SYBR® Green方法进行实时定量检测或者终点法检测。 AgPath-ID™试剂盒 设计了快速简便的反应组装流程。最小化反应组装组分，减少了操作失误造成误差的可能性，并减少了组装反应的时间(Fig 1)。反应组装完成之后，大约一个小时之内就能获得检测结果。 Fig 1. AgPath-ID™ One-Step RT-PCR 步骤。25X RT-PCR酶混合液包含Ambion公司的Arrayscript™反转酶——一种MMLV来源的RT反转酶，具有高cDNA产量的特点；25X RT-PCR酶混合液还包含著名的AmpliTaq Gold® polymerase——一种化学修饰的热启动酶，能够确保高效特异地扩增目标片断。优化的2X RT-PCR反应buffer能够确保高产高效地反转反应与PCR反应。2X RT-PCR buffer内还包含了ROX阳性参照染料用于标准化定量信号，矫正系统误差。此外，试剂盒还提供了一种可选的检测增强试剂，用于扩增高GC或者富含二级结构的模板。另外，试剂盒还提供了超纯的无核酶水。 出色的线性与灵敏度 下图是使用AgPath-ID™ One-Step RT-PCR试剂盒扩增梯度稀释的牛腹泻病毒(BVDV)标准对照RNA，一致的扩增曲线显示AgPath-ID One-Step RT-PCR试剂盒出色的扩增效率(Fig 2)。AgPath-ID™ One-Step RT-PCR试剂盒出色的可靠性与扩增效率覆盖相当广的动态范围，样品模板量从5 × 106至16个拷贝。 Fig 2. AgPath-ID™ One-Step RT-PCR试剂盒检测小于20个拷贝的BVDV标准对照RNA。梯度稀释的BVDV标准对照RNA（5 × 106至16个拷贝）使用qRT-PCR检测，每个样品重复三次。左上角标准曲线可以看到每个稀释梯度的拷贝数以及线性。 相比市场上原有的一些同类产品，AgPath-ID™ One-Step RT-PCR试剂盒具有更出色的灵敏度。使用流感病毒matrix基因RNA作为标准样品，AgPath-ID™ One-Step RT-PCR试剂盒相比某竞争产品能够得到更低的Ct值，同时在2到2048个拷贝的动态范围内具有更好的线性(Fig 3)。 Fig 3. AgPath-ID™ One-Step RT-PCR试剂盒超级的灵敏度表现。流感病毒matrix基因RNA标准样品梯度稀释（2-2048拷贝）之后使用Ambion的AgPath-ID™与市售另一同类产品进行qRT-PCR检测。 产品信息： Cat# Product Name Size AM1005 AgPath-ID™ One-Step RT-PCR Kit 100 rxns