植物病原检测试剂


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检测项目：植物病毒病、细菌病、真菌病诊断ELISA试剂盒。包括150多种病毒病，40多种细菌、真菌病。

试剂盒类型

SRA型产品包括：微孔板； 抗体溶液； 酶标抗体溶液（其他试剂自备）

产品规格：SRA /500，/1000，/5000

PSA型产品包括（完整试剂盒，全部试剂）

包被抗体的微孔板； 抗体溶液； 酶标抗体溶液； 底物；缓冲液；反应停止液；洗板；缓冲液；样品提取液

产品规格：PSA /96，/288，/480

实验步骤

1． 包被抗体，取出实验所需数量的微孔，每孔加100 ul抗体溶液。室温下（25℃）在恒湿箱中孵育4小时或在4℃条件下过夜。孵育结束后洗板，将反应孔中的试剂甩干，加入250ul的PBST缓冲液，之后快速倒出，重复4-5次。将微孔板倒扣在吸水纸上轻敲，以完全除去孔中液体。

2． 加样，在对应孔中加入100 uL样品提取液，100 uL阳性质控溶液，100 uL阴性质控溶液。室温下（25℃）在恒湿箱中孵育2小时。孵育结束后洗板，步骤同上。

3． 加酶标记物，孵育2小时，孵育结束后洗板，步骤同上。

4． 加底物溶液，室温下（25℃）在恒湿箱中孵育30-60分钟。此时出现颜色变化。

5． 加反应停止液。

6． 读数，结果判定。

结果判定

目测：

样品孔中颜色对照阴性质控有明显变化的为阳性（黄色）

样品孔中颜色对照阴性质控无明显变化的为阴性（无色）

酶标仪读数：

样品吸光度值≥2倍阴性质控吸光度值，为阳性

样品吸光度值＜2倍阴性质控吸光度值，为阴性

检测原理

采用酶联免疫吸附检测技术（ELISA），利用病原的特异性抗体来检测病原。在微孔板包被有病原的特异性抗体，样品提取液中的病原结合到抗体上，加入的酶标记物（酶-抗体）又可结合到病原上形成双抗体夹心复合物，酶催化特异性底物显色。样品孔出现明显颜色变化的是阳性结果，无颜色变化的则是阴性。