一、基因重组胰蛋白酶   产品用途

 
1. 基因重组胰蛋白酶用于贴壁细胞的消化。
2. 基因重组胰蛋白酶除了具备传统动物源胰酶所有的功能外，还用于严禁接触动物源组分的生物制药、生物治疗等相关领域。

  二、基因重组胰蛋白酶   产品原理

 
胰蛋白酶（Trypsin）是一种丝氨酸蛋白水解酶。其前体为无生物活性的胰蛋白酶原（trypsinogen），产生于胰脏。随胰液分泌到小肠中，被小肠中的肠肽酶激活后，能将蛋白质分解为多肽，进而分解成为氨基酸。其切割肽链的位点主要位于赖氨酸或精氨酸的羧基端。故在体外细胞培养中，胰蛋白酶被用于消化贴壁细胞以获得相互分离的单个细胞。
传统使用的胰蛋白酶，取自牛、猪或羊的胰脏，经后期的纯化结晶而得。动物来源与生产工艺先天决定了传统胰蛋白酶有较高的外源病毒污染与杂酶污染的可能性，无法应用于生物制药与细胞治疗等临床领域。并且需要-20℃保存。
基因重组胰蛋白酶，是由重组大肠杆菌表达生产，氨基酸序列与猪胰腺来源的阳离子型胰蛋白酶完全一致。酶切特异性相同。分子量为24kD，适宜pH为7-10。除了具有传统天然胰酶所具有的消化切割肽链的功能外（细胞间的蛋白消化），由于其并不是源于猪、牛或羊的胰脏，所以产品不含任何动物来源组分，也由于重组蛋白生产的产物单一性特点，产物中除了胰蛋白酶，没有传统胰酶中不可避免的糜蛋白酶等组分。另外，特有的对重组蛋白甲基化修饰的生产工艺设计，使得重组蛋白的温度稳定性大为提高，产品可以稳定的保存在2-8℃环境中。无需-20℃保存。

 
三、基因重组胰蛋白酶   产品规格

NC1002，基因重组胰蛋白酶，100ml/瓶，2-8℃保存，效期12个月。

四、基因重组胰蛋白酶   产品性能

1. 基因重组胰酶，纯度更高、杂质更少，批次更稳定。

 传统胰酶取自猪、牛或羊的胰脏。胰脏中除了胰蛋白酶，还有其他蛋白酶。而生产工艺的特点决定了产品不可避免的会有其他杂质。
基因重组胰蛋白酶是由重组大肠杆菌表达生产，产品不含任何动物来源组分，也由于重组蛋白生产的产物单一性特点，产物中除了胰蛋白酶外，没有传统天然胰酶中的糜蛋白酶等组分。

 液相色谱图中，传统胰蛋白酶溶液的高效液相色谱图除了目的峰以外，其他杂峰（杂质出的峰）很多。
（原理：待检物的液相色谱图中，杂峰越少，待检物越纯。反之就越杂。）

                                       重组胰酶液相色谱图(几乎无杂质,纯度高)

2． 2-8℃保存，无需-20℃保存，即取即用，无需等待

 
大肠杆菌表达的重组蛋白，通过采用重组胰蛋白酶的甲基化修饰工艺，提高了胰蛋白酶的温度稳定性，做到了2-8℃的稳定保存。真正做到了即取即用，不需等待。

五、基因重组胰蛋白酶的产品应用数据与图片

 
1. 各种胰酶消化能力对比

 
2. 基因重组胰蛋白酶对不同细胞的消化能力

3. 对于难消化的细胞的消化方法

对于难消化的细胞，有两种消化方法——常规消化法和预消化法。

 
我们推荐使用预消化方法消化。以 MDCK为例，常规消化需要13-15min，预消化需要10-13min。  

六、重组胰酶使用过程中常见问题汇总

 
1. Q：第一次使用重组胰酶，按传统方法进行保存了？并且反复冻融，对活性有影响吗？
A：严格按说明书要求2-8度保存,避免反复冻融, 重组胰酶经过反复冻融十次活性无明显变化，相比传统胰酶更为稳定，如误操冷冻后溶解可继续使用。

2. Q：重组胰酶消化特点与传统胰酶一致吗？有什么特殊或需要注意的地方？
A：重组胰酶消化要比传统胰酶较快速，故大部分细胞消化时间会有所提前，需要避免消化过度，其它步骤与传统胰酶无差别 。

 
3. Q：血清培养基和含血清培养基培养的细胞用重组胰酶消化有什么需要注意的？
A：无论在无血清培养基，还是在有血清培养基体系内培养的细胞，消化前均需要用无钙镁的缓冲液冲洗细胞，保证消化的效果。

 
4. Q：对于难消化的细胞如何提高消化效率？
A：如MDCK一般消化时间在13-15min，可以采用先预消化1min，弃去消化液，再加入新鲜消化液继续消化，时间可缩短3-5min。

 
5. Q：既然重组胰酶纯度高，活性强 ，是不是消化时可以减少用量？
A：消化时间在3min以内的细胞，可减少用量 （比如T25瓶 传统胰酶用1ml，重组胰酶用500ul即可）。

七、基因重组胰蛋白酶 产品质控指标

PH值： 7.0-7.4
渗透压：270-350 mOsm/Kg
无菌： 霉菌、细菌不得检出
装量：100ml/瓶
外观： 橘红色澄清液体
保存温度： 2-8℃，避光保存