介绍
标记度(DOL),有时称为取代度(DOS),是表征和优化生物共轭物(例如荧光团标记的蛋白质)的特别有用的参数。它表示为标记/蛋白质形式的摩尔比。通常,具有较低DOL值的缀合物倾向于具有较弱的荧光强度。然而,具有非常高的DOL值(例如DOL> 6)的生物缀合物也可能经历减少的荧光。这通常是由荧光团的自猝灭引起的。 准确的DOL值将允许研究人员找到给定标记的最佳生物共轭比率,并确保结合结果的再现性。
对于抗体,最佳DOL通常在2到10之间。然而,更精确的值将在很大程度上取决于标记和蛋白质的性质。 这意味着对于许多生物共轭,最佳DOL必须通过实验确定,通常通过几个小批量标记。 对于AAT Bioquest的抗体标记试剂盒,已经测试了最佳DOL和试剂量。 对于其他生物共轭物,下面的工具可用于计算标记程度。
使用说明
如何使用此工具:
1.从下拉菜单中选择目标。 选择目标后,将显示标签列表。
2.从下拉菜单中选择一个标签。
3.输入目标和标签的最大吸光度值。注意,所提供的波长是给定化合物的典型最大波长。但是,为获得最佳结果,请使用由实际分光光度计读数确定的最大吸光度。
4.按计算按钮显示结果。
https://www.aatbio.com/tools/degree-of-labeling-calculator