WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF, Immunofluorescence; F, Flow cytometry.
H, human; M, mouse; R, rat.
本Cytochrome C抗体(Cytochrome C antibody,细胞色素C抗体)为进口分装,用变性的重组人Cytochrome C作为抗原制备而成的抗Cytochrome C小鼠单克隆抗体。克隆号为7H8。
本Cytochrome C抗体识别的是总Cytochrome C (total Cytochrome C),可以检测内源性的Cytochrome C,未发现和其它激酶有交叉反应。
本抗体可以用于通过Western或免疫荧光检测线粒体内的Cytochrome C的释放情况,以确定Cytochrome C释放和凋亡的相关性,或直接用Cytochrome C释放来判断细胞凋亡的状况。正常细胞Cytochrome C的染色集中在线粒体,而凋亡细胞的Cytochrome C则呈弥散分布。
Cytochrome C,即细胞色素C,是线粒体电子呼吸链中的一个重要蛋白。Cytochrome C在进化上高度保守。当细胞发生凋亡时,细胞色素C会从线粒体中释放到细胞浆中,并且作为细胞凋亡的关键调控步骤。在细胞色素C和dATP存在的情况下,Caspase-9和Apaf-1可以相互结合,并促使Caspase-9激活。细胞色素C的释放和Caspase-9的激活对于激活其它的Caspase包括Caspase-3,以及导致后续的DN**段化(DNA fragmentation)至关重要。细胞凋亡的抑制蛋白,Bcl-2或Bcl-XL都可以抑制细胞色素C从线粒体的释放;而细胞凋亡的促进蛋白Bax,可以诱导细胞色素C从线粒体的释放。
Cytochrome C从线粒体释放到细胞浆中常被作为细胞凋亡的一个重要指标。
配套提供了Western一抗稀释液,可以用于Western检测时的一抗稀释。
建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整):
WB | IP | IF | F |
1:200 | 1:20 | 1:50 | 1:50 |
本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
AC909-1 | Cytochrome C抗体(小鼠单抗) | 100μl |
AC909-2 | Western一抗稀释液 | 20ml |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
Cytochrome C抗体-20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项:
在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. Western检测:
A. 按照1:200用碧云天提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
B. 把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜或室温缓慢摇动2小时,确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。
C. 回收稀释的一抗,4℃保存以备下次继续使用。
D. 按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。
2. 免疫染色:
可以使用碧云天生产的免疫染色一抗稀释液(P0103)稀释抗体,使用后注意回收稀释好的一抗,
3. 其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。