AAV技术服务
汉恒生物科研团队现已全面推出腺相关病毒(AAV)包装技术服务,并有多达12种的血清型载体及多种汉恒专业改造的突变载体可供选择,特异性地针对不同的组织器官。专业的科研团队,一流的技术服务,欢迎来电咨询,全国免费技术服务热线:400-092-0065
产品简介
腺相关病毒(Adeno-Associated Viral Vector,AAV)属于微小病毒科( parvovirus),为无包膜的单链线状 DNA 病毒。AAV 的基因组约 4700bp,包括上下游两个开放读码框架(ORF),位于分别由 145 个核苷酸组成的 2 个反向末端重复序列(ITR)之间。 由于腺相关病毒具有宿主范围广、安全性高、免疫原性低、表达稳定和物理性质稳定等优点,已被广泛地应用于基础研究和临床试验中,并且腺相关病毒载体已成为世界上最常用的基因治疗载体之一。
图 1. AAV 基因组结构
AAV病毒特点
1. 安全性高:迄今从未发现野生型 AAV 对人体致病,重组 AAV 基因组序列上去除了大部分的野生型 AAV 基因组元件,进一步保证了安全性;
2. 免疫原性低:AAV2 的基因组仅 4681 个核苷酸,便于用常规的重组 DNA技术进行操作,而且进行动物实验时造成的免疫反应小;
3. 宿主范围广:能感染分裂细胞和非分裂细胞;
4. 表达稳定:能介导基因的长期稳定表达;
5. 物理性质稳定:在 60℃不能被灭活,能抗氯仿;
AAV生物学特性
表1 不同病毒的生物学特性比较
|
慢病毒 |
逆转录病毒 |
腺相关病毒 |
腺病毒 |
包膜 |
有 |
有 |
无 |
无 |
颗粒直径 |
90-100 nm |
90-100 nm |
20-30 nm |
60-90nm |
基因组 |
dsRNA |
dsRNA |
ssDNA |
dsDNA |
表达起始时间 |
48-72h |
48-72h |
72-96h |
24-48h |
表达持续时间 |
> 2 months |
> 2 months |
> 6 months |
~1 month |
宿主基因组整合方式 |
随机高频整合 |
随机高频整合 |
定向低频整合或非整合 |
非整合 |
AAV载体不同血清型
研究发现 AAV 具有多种血清型,各种不同血清型的 AAV 载体的主要区别是衣壳蛋白不同,因此对不同的组织和细胞的转染效率存在差异。目前汉恒生物在包装腺相关病毒时有 12种不同的 AAV 血清型可供客户选择,建议客户针对不同组织器官选择相应血清型的 AAV 病毒,见表 2。
表2. 12种不同血清型AAV对各组织器官细胞的亲和性
血清型 |
组织亲和性 |
AAV1 |
肌肉,心脏,骨骼肌(包括心肌),神经组织 |
AAV2 |
中枢神经,肌肉,肝脏,脑组织,眼, |
AAV3 |
肌肉,肝脏,肺,眼 |
AAV4 |
中枢神经,肌肉,眼,脑 |
AAV5 |
肺,眼,中枢神经,关节滑膜,胰腺 |
AAV6 |
肺,心脏 |
AAV7 |
肌肉,肝脏 |
AAV8 |
肝脏,眼,中枢神经,肌肉 |
AAV9 |
心脏,肌肉,肺(肺泡),肝脏,中枢神经 |
DJ |
肝脏,视网膜,肺,肾脏 |
DJ/8 |
肝脏,眼,中枢神经,肌肉 |
Rh10 |
肺, 心脏,肌肉,中枢神经,肝脏 |
服务流程
AAV应用介绍
A. AAV9感染小鼠脑组织(PMID: 23503602)
B. AAV2感染大鼠脑组织
C. AAV2感染肾脏(PMID: 23216315)
D. AAV感染心脏(PMID: 20703310)
E. AAV9感染骨骼肌(PMID: 21811247)
F. AAV感染肝脏(PMID: 19861950)