锐赛小课堂:
锐赛慢病毒开学礼:4个病毒10000
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什么是MOI值?如何进行MOI值摸索?
MOI(Multiplicity of Infection,感染复数)是指病毒感染细胞的比例。选择合适的MOI值,病毒的感染效率以及目的蛋白的表达量越高,相对细胞的毒性越小。对于分裂活跃的细胞,比如293细胞MOI=1时,95%以上的细胞均可以表达目的基因。而对于非分裂细胞,比如原代细胞,感染效率较低,MOI值可能达到200-300。我们建议通过比较不同MOI(比如0、1、5、10、50、100等)感染细胞的结果,选择适合的MOI进行实验:可以先将培养好的细胞接种至96孔板,然后用携带报告基因EGFP的阴性对照病毒,按照不同MOI值比例感染细胞,进行MOI值摸索。
可以对miRNA的成熟序列进行慢病毒包装吗?
可以,请提供miRNA的成熟序列的序列信息即可。我们将进行miRNA过表达慢病毒载体的构建及包装、滴度检测及miRNA的qPCR检测,详情可见miRNA病毒包装服务内容。
包装好的病毒在使用中要注意哪些安全性问题?
病毒的使用要求在生物安全标准2级(BL2)的实验室进行,操作人员穿工作服、戴口罩及一次性乳胶手套。操作时应在指定的区域内使用II级生物安全柜;操作时动作尽量轻柔,避免产生气溶胶和飞溅;含有病毒的废液和用具可用121℃高压灭菌30分钟;使用锐器(如注射器、刀片)时务必要小心。
订制的腺病毒产品接收后如何保存和使用?
我们采用干冰特快专递方式将病毒递送到客户手中。客户收到后,应注意以下几点:
1)确认泡沫塑料盒中的干冰仍有剩余,冰盒内保持低温;2)确认泡沫塑料盒内物品与发货样本清单一致,腺病毒产品包装完整,没有破碎、渗漏;3)公司提供分装好的腺病毒产品,短时间内不使用请冻存于-70℃超低温冰箱中。半年内使用完毕。4)冻存于-80℃超低温冰箱中的腺病毒产品使用前取出,冰上融解,尽快使用。如果解冻后的病毒暂时用不完,滴度足够高时(比如10^11-12 IU/ml),4℃可保存1~2周。
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