What is RPA?
概念:重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性,最佳反应温度在37°C左右。
RPA技术原理:
重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物,能在双链DNA中寻找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就会发生链交换反应形成并启动DNA合成,对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的DNA链与SSB结合,防止进一步替换。在这个体系中,由两个相对的引物起始一个合成事件。整个过程进行得非常快,一般可在十分钟之内获得可检出水平的扩增产物。
Who uses RPA?
以此为基础的TwistAmp® 核酸扩增产品,能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测该技术对硬件设备的要求很低,特别适合用于体外诊断、兽医、食品安全、生物安全、农业等领域。
RPA等温扩增试剂盒配套试纸条发表的文献
1、Piepenburg O., Williams C.H., Stemple D.L., Armes N.A.
DNA detection using recombination proteins. PLoS Biol 2006; 4(7): e204.
DOI:10.1371/journal.pbio.0040204https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1475771/pdf/pbio.0040204.pdf
2、Saldarriaga O. A. et al., An Innovative Field-Applicable Molecular Test to Diagnose Cutaneous Leishmania Viannis ssp. Infections. PLoS Negl. Trop. Dis. 2016; 10 (4)https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4845993/pdf/pntd.0004638.pdf
3、Yang Y et al., Development of an Isothermal Amplification-Based Assay for Rapid Visual Detectionof an Orf Virus. Virol. J. 2016; 13:46
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4799565/pdf/12985_2016_Article_502.pdf
4、Cordray MS et al., A Paper and Plasitc Device for the Combined Isothermal Amplification and Lateral Flow Detection of Pla
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