伯豪生物 “生物标志物验证平台”推出专门针对LncRNA靶标验证的研究策略及技术服务:采用高灵敏度、准确和快速的技术方法,利用崭新的多核酸因子检测技术Quantigen的QGP技术、荧光定量PCR技术、以及LncRNA的原位杂交技术等对LncRNA标记物进行层层验证。
LncRNA的低通量多基因大样本验证:与Affymetrix公司合作Panomics的branch DNA-QGP技术,进行3-80个lncRNA的同时定量分析的大样本验证检测;
LncRNA的多基因或单基因验证:Taqman探针法或Sybgreen法进行多个或单个LncRNA表达水平的检测;
LncRNA的原位检测:ViewRNA原位杂交技术进行单个LncRNA的表达水平、分布、以及与潜在靶基因表达的相关性研究。
一、LncRNA的低通量多基因大样本验证技术
Affymetrix公司旗下的Panomics开发出的Branch-DNA(bDNA)技术是一种三明治结构的核酸杂交方法,该方法采用 bDNA 分子放大捕获的目标 RNA 信号。bDNA 测定的优势是直接从样本中获得RNA进行分析,无需对 RNA 进行提纯或酶处理,从而避免了这些过程中可能引起的分析效率下降以及RNA降解。
Affymetrix-Panomics的Quantigen 的QGP技术可以实现LncRNA多基因大量样本的检测。
技术优点:
- 在80或更多个样本中,同时定量测量3-80个 LncRNA目标,准确性与精确度无与伦比;
- 无需抽提纯化RNA,直接定量来源于培养细胞、全血或组织(新鲜、冰冻或福尔马林固定、石蜡包埋 (FFPE)等样本的LncRNA;
- RNA无需反转录及目标放大;
- 简单的测定流程
二、LncRNA的多基因或单基因验证
运用荧光定量PCR的技术,采用Taqman探针法或Sybgreen法进行多个或单个基因或LncRNA表达水平等检测。
三、LncRNA的原位检测
应用Affymetrix的ViewRNA荧光原位杂交技术进行LncRNA的检测:
- 便捷的LncRNA原位研究技术;
- LncRNA原位表达水平及分布检测;
- 灵敏度甚至可以达到单细胞水平检测单拷贝核酸分子;
- 适合细胞、血液、FFPE样本等;
- 可以做双色以上的原位检测,使得LncRNA与其潜在的靶基因的作用相关性的直观研究成为可能。
LncRNA在胃癌细胞中的表达(图中绿色信号点为LncRNA)