T细胞具有多种生物学功能,如直接杀伤靶细胞,辅助或抑制B细胞产生抗体,是人体内为抵御疾病感染、肿瘤而形成的 “战士” 。T淋巴细胞在适应性免疫系统中发挥核心作用,产生多种细胞因子的多功能T细胞被认为是最有效的抗肿瘤效应T细胞。
随着免疫肿瘤学作为多种癌症治疗手段的出现,了解多功能T细胞分化和功能的潜在机制对于开发有效的治疗方法至关重要。想要在异质样本中找到多功能T细胞,科学家必须能够在单细胞水平上表征细胞因子分泌和细胞毒性。常规的针对免疫细胞进行功能分析的手段包括ELISA、Elispot、流式细胞仪、微流控多重因子分析、活细胞成像以及单细胞测序等。然而,大多数在单细胞水平上分析T细胞细胞因子分泌的现有方法都是破坏性的,因为活细胞在分析之后无法被回收,阻碍了将细胞因子分泌与其他功能参数(如细胞毒性和基因表达)相关联的研究。
基于单细胞功能表征平台Beacon®的Opto® T 细胞工作流程使全面分析单个T细胞并将此表型和功能数据与这些相同细胞的基因型相关联变成可能。
单细胞实验——多功能性和细胞毒性
使用多重细胞因子检测(图1)研究 T 细胞与抗原呈递细胞 (APCs) 相互作用时细胞因子的分泌。可使用多种预先与捕获分子和细胞表面标记物结合的微珠来定制多达三种细胞因子组合的实验。
肿瘤杀伤力可视化
细胞毒性实验利用抗原呈递细胞(APCs)中caspase-3激活过程,将T细胞样本中的不同杀伤(图2和图3)可视化,以便您可以轻松捕获缓慢和快速的 APC 杀伤。细胞毒性实验可与多重细胞因子实验结合使用,可将杀伤能力与细胞因子分泌直接相关联。
将表型与基因表达相关联
回收感兴趣的活细胞并将独特的行为直接与基因型或基因表达联系起来。TCRseq Well Plate试剂盒允许您扩增 TCR α 和 β 链,并为下一代测序做好准备(图4A)。或者使用 OptoSeq Single Cell 3’mRNA 试剂盒对cDNA 进行扩增和测序并分析差异基因表达谱(图4B)。OptoSeq Single Cell 3’mRNA 试剂盒捕获所有mRNA,因此与细胞毒性实验不兼容。
将珍贵样品功能表征最大化
Beacon®平台的技术核心是 OptoSelect® 芯片,其中包含数千个NanoPen® 小室。使用光电定位 (OEP)(图5)将单个T细胞分类和分离或加载到NanoPen®小室中。加载后,可以对单个T细胞进行多种分析。然后使用软件直观地进行分析以选择感兴趣的表型,并指导下游检测活细胞的回收。
图5:每个 OptoSelect® 芯片包含数千个NanoPen®小室。 OEP™ 用于将细胞加载到 OptoSelect® 芯片上,随后进行单T细胞分析和回收以用于下游检测。
寻找最佳T细胞的一站式平台
使用相同细胞进行多种检测的能力使人们能够更好地了解潜在地生物学信息。在各种平台上单独进行的传统检测很难理解因果关系以及驱动T细胞活动的因素。
Opto® T 细胞功能表征工作流程让您可以直接将单细胞表型和功能与基因表达联系起来。
这种将表型与基因表达直接联系起来的独特能力为T细胞生物学、免疫反应以及如何设计强大的T细胞疗法提供了新的洞见。
欲了解Opto® T细胞功能表征工作流程详细信息,请您关注“Berkeley Lights”微信公众号回复“T细胞”获取完整产品手册。
关于PhenomeX
PhenomeX(NASDAQ: CELL)致力于助力科学家充分探索每个细胞的潜能,推动功能细胞生物学迈向新纪元,以促进人类健康发展。我们为科学家提供揭示细胞功能的完整见解,使其全面了解每个细胞的深度功能表征。我们经过验证的独特高通量工具和服务提供了无与伦比的解决方案,加速了多功能细胞研究发展,成为改善疾病预防和治疗的关键。我们屡获殊荣的平台已获得全球各地研究人员的高度认可,包括全球前15家制药公司的研究人员,以及约85%的美国**综合性癌症中心的科研人员。
PhenomeX家族的单细胞功能表征平台(原Berkeley Lights)Beacon®基于其特有的光电定位技术 (OptoElectro Positioning, OEP™) 为广大科学家提供了先进的研究手段,对数以万计单细胞的基因信息、功能等进行深入表征,以筛选出满足用户需求的目的细胞。Beacon®应用场景涵盖抗体发现、细胞株开发、传染病研究、免疫学研究、肿瘤生物学研究、细胞疗法开发、基因编辑、农业科学等多个领域,为从事尖端的科研项目及加速企业生物产品的开发提供了前所未有的机遇。
PhenomeX家族的单细胞蛋白质组学平台(原IsoPlexis)是单细胞多组学不可或缺的重要组成部分,在临床科研领域,针对评估和检测人体单细胞免疫能力、筛选癌症治疗方案、预测评估临床疗效及安全性等方面有着丰富的成功经验,为预测病人长期生存、早期筛选治疗获益患者提供了详实的参考数据,帮助世界各地的科研人员在肿瘤免疫、细胞治疗、肿瘤学、抗感染免疫研究及疫苗开发、自身免疫病、移植免疫等方向取得了众多突破性成果,助力加速临床科研、医学和生命科学行业发展。
IsoPlexis和Berkeley Lights已合并成立新公司PhenomeX