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大鼠皮肤成纤维细胞

作者:江阴齐氏生物科技有限公司 2014-09-19T16:11 (访问量:2537)

细胞描述
成纤维细胞是皮肤的主要细胞成分,具有合成和分泌三种纤维以及基质的功能。在间质的更新和创伤修复过程中,具有十分重要的作用。真皮成纤维细胞主要分布于黏膜和皮下疏松结缔组织,胞质内富含嗜碱性颗粒。
试剂和材料
乳鼠 、Collagenase-3,Trypsin、血清、DMEM/F12基础培养基
实验步骤
1、将乳鼠放入75%酒精中浸泡约5min,取出皮肤,将皮肤组织剪成1mm3大小的组织块。
2、加入0.2%的胰酶和胶原酶III的混合酶液,37℃消化约40min;
3、过200目筛网,收集滤液,1500rpm离心5min,沉淀用适量培养基重悬,接种到25cm2培养瓶中,放入培养箱培养。
细胞传代及冻存
1、细胞生长至对数期,细胞达到80-90%融合。
2、移除细胞培养基,PBS清洗细胞2次。
3、加入0.25%胰酶,37℃消化,镜下观察细胞回缩变圆,完全培养基终止消化。
4、离心,重悬细胞后重新接种于新鲜培养基中。
5、细胞不可冻存。
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