引言

抗体药物在自身免疫疾病、肿瘤治疗等多种应用中发挥越来越重要的作用，从1986年单克隆抗体OKT3上市开始，到2021年FDA审批通过超过100个抗体药物，预计到2025年抗体药物全球的市场规模将达到3000亿美元。目前，抗体药的形式更为多样，ADC（Antibody-Drug Conjugate，抗体偶联药物）、双特异抗体都取得了不俗的成绩，比如靶向HER2的ADC类药物T-DM1（ Ado-trastuzumab emtansine）2021年全球销售额达到21.7亿美元，而治疗血友病的双特异抗体Hemlibra（Emicizumab）在2021年的全球销售额达到33.1亿美元，全球抗体药研究呈现多点开花的状况。

然而，抗体药的靶点集中度高，排名前10位的抗体药物靶点占了上市抗体药物总靶点的42%，临床实验统计，排名前10位的靶点临床数量占总临床数量的36%^【1】。靶点开发集中度高，导致药企间的竞争加大，单品市场空间受到挤压，该特点在国内抗体药领域更明显。

2022年截止到11月中，FDA获批的全新抗体药靶点占获批抗体药总靶点的2/3，另外1/3的老靶点，也是在寻求新的突破，比如CTLA4抗体（tremelimumab）与PDL1抗体（durvalumab）联用获批不可切除的肝细胞癌 (HCC) 治疗，teclistamab是第一款被获批的靶向BCMA的双特异抗体，CD3靶点抗体teplizumab获批新适应症（I型糖尿病）治疗^【2】。

新靶点、联用、新治疗方向和双/多特异抗体药物等让生物制药企业的研发不再单调，但也需要更多的研发和技术投入；因此提高药物开发效率，降低技术开发成本非常必要，抗体药物开发上下游企业风险共担是未来趋势。近岸蛋白拥有从抗原设计及制备、免疫建库，候选分子发现、抗体评价、人源化和细胞系开发的完整抗体分子发现平台，助力抗体药开发。

图1：创新抗体一站式服务平台

抗原定制服务

近岸蛋白拥有超过17000种重组蛋白的开发经验，2000多种在线靶点蛋白产品，人鼠猴等多物种齐全、同一蛋白不同标签（His/mFc/hFc等）满足不同应用场景需求；同时近岸蛋白针对蛋白片段、结构域和复杂蛋白的设计表达有丰富的经验及完善平台，可提供对应定制化服务；快速交付高质量高活性的抗原。

组织相容性复合体（MHC）结构复杂，获得天然结构的MHC完整分子难度大，近岸蛋白基于结构预测和Legotein^®技术平台，设计出接近天然结构的蛋白，并用参考抗体验证成功（见图3）。

图2：人HLA-A*0201 AFP（Novoprotein Cat.No.：C11X）胶图

图3：C11X与特异抗体BLI检测图

重组MHC的纯度达到95%以上，Fortebio检测蛋白与抗体的亲和力KD达到1.6nM，获得的MHC蛋白质量优。

多样的噬菌体抗体库平台

近岸蛋白拥有成熟的噬菌体展示技术，具有100+建库筛选项目经验。目前已经有半合成全人源库（库容可达10¹¹）、小鼠免疫库、共同轻链库。在筛选上，具有成熟的固相和液相筛选技术，可以满足不同靶点的需求；库质量检测体系完善（有效库容、突变率、意外终止率等），可筛选获得识别不同抗原表位，亲和力高（可达10^-12M），特异性强的抗体。下图为噬菌体建库质控流程和抗体库有效库容分析图。

图4：噬菌体建库质控流程图

图5：抗体库有效库容分析图

噬菌体建库过程会采用二代测序来分析库质量，分析内容包括突变率、意外终止率等，有效库容达到标准才进行后续实验。

基于生物活性筛选的杂交瘤平台

近岸蛋白的杂交瘤平台提供多种免疫和筛选路线。蛋白、结构域、细胞、DNA和RNA免疫，可以覆盖大多数靶点；与体外功能平台、检测细胞株等技术平台无缝对接，可以在抗体筛选的早期完成对功能性抗体的高通量筛选，不易错失优质克隆。下图为高通量细胞亲和筛选和生物学功能筛选图。

图6：高通量流式细胞亲和筛选图

图7：报告基因法高通量筛选TSLP抗体图

使用293-TSLP Res细胞株(Cat. No.:XCC22）检测

杂交瘤筛选过程中会引入细胞亲和、生物学功能检测等多种评价方式，确保获得有价值的候选克隆

成熟的抗体构建表达平台

公司拥有多种恒定区、标签的表达载体，可实现快速构建。特有的原核表达载体可以提升周质表达效率，使原核表达抗体更可靠；293和CHO细胞的瞬转表达系统可实现2周内小样抗体制备。

图8：重组抗体哺乳和原核表达纯化图

丰富的体外功能评价平台

体外功能评价平台包含技术覆盖了亲和检测、Fab端功能检测和Fc端功能检测，同时也有多种特殊技术包括嵌合受体信号劫持、肿瘤细胞杀伤、抗病毒中和检测等，保证新靶点功能评价方法的成功率。下图展示了体外功能评价的相关技术及举例。

图9：公司的抗体体外评价相关技术图

图10：NKG2D抗体嵌合受体法检测原理及检测结果图

充分理解靶点，获得的NKG2D的抗体在溶液和包板均可以激活信号传导，比参考抗体效果更优。

高效且基于理性设计的人源化平台

近岸蛋白基于自身独有抗体人源化平台，为客户提供优质的抗体人源化服务，通过计算机辅助结构模拟设计对抗体进行CDR移植以及FR回复突变，人源化改造后的抗体保持与亲本相同的亲和力和特异性。

人源化平台特色：

3D建模：相比于传统的抗体同源建模更精准

高效：算法独特计算速度更快，人源本地基因库可实现离线操作

精准：回复突变平台可精准识别FR区域关键氨基酸

下图展示了抗体3D结构模拟以及近岸自主研发的同源序列对比算法与NCBI-IgBLAST的结果比对。

图11：抗体3D结构模拟图

图12：近岸平台与其他平台的MSA结果对比

检测细胞株构建及检测平台

可提供多种类型的细胞株筛选服务，包括抗原过表达细胞株、报告基因细胞株和GFP/Luc过表达肿瘤细胞株等，满足抗体开发的多种需求。该平台拥有筛选技术多样、多种报告基因供选择、检测周期短和通量高等优点，为客户提供优质服务。下图为报告基因细胞株和过表达细胞株检测相应抗体活性和亲和图。

构建的293-IL36 Res细胞株，可以准确的评价IL36R抗体；Claudin 18.2和Claudin 18.1细胞株用特异性抗体检测，两株细胞均达到要求。

CHO细胞系开发平台

公司拥有CHO-K1和CHO-DG44两套细胞株开发平台，细胞来源溯源清晰，拥有单细胞成像系统（Cell Metric）验证单克隆性，满足IND申报法规要求。公司的细胞株筛选有以下特点：

高产：平均表达量2-5g/L

稳定：超过60个PDL评估确保商业化生产

快速：最快约3个月即可获得稳定高产的单克隆细胞株。

近岸蛋白自主研发抗体pipeline

图17：自主研发抗体pipeline

参考文献

[1] Asher Mullard. FDA approves 100th monoclonal antibody product. Nature reviews drug discovery. 2021

[2] http://www.accessdata.fda.gov/

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